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對每種細胞類型或組織焚型單壯優(yōu)化表解,使用l化試管或低吸附試管。確保所有試劑都是新鮮配制的,且沒有污染物。增加洗滌次數(shù)。運行一次"無DNA"PCR反應(yīng),以確定您的樣品是否被核酸污染。 使用PCR的專門應(yīng)用移液管;在設(shè)置PCR之前,使用紫外性照射移液管。采用專門應(yīng)用移液管,在三個不同的房間/區(qū)域進行ChIP、DNA純化和PCR反應(yīng)設(shè)置,或在遇風(fēng)期內(nèi)設(shè)置反應(yīng)。?避免使用票裝水或其它形式的預(yù)包裝水。使用從含有紫外光源的Mll-QR系統(tǒng)中制造的水。使用防霧移液管吸頭。上海益啟生物的抗體詢價聯(lián)系方式。楊浦區(qū)H3抗體抗體聯(lián)系電話
非特異性條帶 抗體(一抗或二抗)濃度過高 降低抗體濃度。 SDS可能引起對固定蛋白條帶的非特 轉(zhuǎn)膜后,振蕩洗滌 異性結(jié)合 在操作過程中不使用SDS。 條帶擴散 抗體(一抗或二抗)濃度過高 降低抗體濃度。 在凝膠上載入過多蛋白 減少蛋白上樣量。 黑色印跡,白色條帶, 抗體(一抗或二抗)濃度過高 減少抗體濃度,特別是HRP偶聯(lián)的二抗。 或信號快速減少 免疫沉淀 采用抗體-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法將特異性蛋白從細胞或組織裂解液中分離出來。崇明區(qū)Abcam抗體抗體報價Upstate抗體哪家靠譜?
Troubleshooting 問題 微珠計數(shù)不足 本底過高 微珠不在制定的區(qū)域內(nèi)或圈門中 整個微孔板的信號與本底相同 陽性對照的信號任樣品信號過高或飽和 樣品信號過低 樣品和/或標(biāo)準品CV值較大 微孔板洗板機吸液高度設(shè)置過低微珠混合物配制不當(dāng) 樣品顆粒物或粘度引起干擾 沒有正確調(diào)整探針高度 本底孔受污染 洗滌不充分 Luminex只器沒有正確校準或近期沒有校準 沒有正確詞整門設(shè)置 微珠區(qū)域設(shè)置錯誤所用樣品類型不正確只器沒有洗滌或primed 做珠暴露于光下檢測不正確或檢測不到未加入抗體
如果目標(biāo)蛋白的種屬不包括在已檢測的種屬中,您可以通過蛋白數(shù)據(jù)庫快速檢查特異性蛋白序列。 抗體種屬來源 一抗的種屬來源在選擇二抗時有很大的作用。二抗應(yīng)盡量與您的樣本物種相隔較遠。 在說明書或供應(yīng)商網(wǎng)站上查詢已驗證的數(shù)據(jù): 1、查看說明書或供應(yīng)商網(wǎng)站上的驗證數(shù)據(jù)并檢查數(shù)據(jù)質(zhì)量,及驗證實驗方法。 2、查看檢測的樣本為何種類型(細胞裂解液、組織勻漿=等)。 3、只使用純化重組蛋白得到的結(jié)果可能無法作為細胞或組織樣本的比較好參考!益啟生物的抗體怎么樣?
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有價值的研究工具,目的是研究某一特定蛋白的關(guān)鍵信息,包括:小規(guī)模蛋白純化用于功能研究,N-端序列分析,蛋白-蛋白相互作用的研究,細胞或組織中蛋白相對豐度和分布的測定。免疫沉淀分析法的成功取決于兩個主要因素:原始樣品中抗原的豐度和抗體對該抗原的親和力(一般需要108 M-1或以上的親和力)。在開始免疫沉淀之前,確保特定的步驟有適當(dāng)?shù)膶嶒瀸φ铡φ湛贵w在性質(zhì)上盡可能與該特異性抗體類似??蒲杏每贵w保證質(zhì)量-益啟生物公司。閔行區(qū)Merck抗體抗體商家
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在解育過程中,檢查密封蓋與平板的接觸情況。確保樣品所用的稀釋倍數(shù)在數(shù)據(jù)計算范圍內(nèi)。認真遵守產(chǎn)品說明書中的指示(第育時間、稀釋等)。 確保樣品根據(jù)建議的樣品操作抽提、配制和貯藏(聚丙烯試管,澄清樣品的貯戴溫度為-20℃)。 多因子免疫檢測法(Multiplex) 多因子檢測是在一次分析中分析多個靶標(biāo)蛋白的方法。它是生物標(biāo)記物篩選和蛋白分析的創(chuàng)新技術(shù),它使研究人員能夠同時考察多重細胞間或細胞內(nèi)的總蛋白或磷酸化蛋白,這些蛋白涉及細胞、組織或有機體的功能。楊浦區(qū)H3抗體抗體聯(lián)系電話