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來源: 發(fā)布時間:2022-03-15

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每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值,直到達到平臺,提示細胞已經(jīng)形成致密單層;或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率,以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用。細胞單層匯合后,用DPBS清洗一次細胞,加入含有不同濃度藥物(一般10-200μM)的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運輸效果,則上層小室中加藥物,下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液;反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)(60rpm震蕩或者不震蕩)1-2h,到達時間之后,分別從細胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液(一般50μL )轉(zhuǎn)移至新的轉(zhuǎn)運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物,分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液,通過多孔閃爍讀板儀讀值。

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