Laemmli 加樣緩沖液(2×)是一種以溴酚藍為染料的 2 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液,主要 由 2-ME、SDS、溴酚藍、Laemmli 分層緩沖液等組成,可用于不連續(xù)蛋白電泳的上樣。 組成: 編號 名稱 PE0005 5ml Storage Laemmli 加樣緩沖液(2×) 使用說明書 4℃ 1份 操作步驟(光供參考): 1、 取適量的蛋白樣品和 Laemmli 加樣緩沖液(2×)等量混合,充分混勻。 2、 直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內即可。 3、 通常電泳至藍色染料到達 PAGE 膠的底部附近即可停止。 注意事項: 1、 Leagene Laemmli 加樣緩沖液(2×)中含少量β-巰基乙醇,有輕微刺激性氣味。 2、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 個月有效。亦可室溫短期保存。利福平溶液怎么配制:過濾滅菌后,小份分裝(1-2ml每管)后,置于-20℃保存。甲基綠染色液(2%)
緩沖溶液的配制和應用:為了配制一定pH的緩沖溶液,首先選定一個弱酸,它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值,然后計算酸與堿的濃度比,根據(jù)此濃度比便可配制所需緩沖溶液。以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計算和配制方法。對于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。緩沖溶液在物質分離和成分分析等方面應用普遍,如鑒定Mg2 離子時,可用下面的反應:白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸,故反應需在堿性溶液中進行,但堿性太強,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反應的pH值需控制在一定范圍內,因此利用NH3·H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液,保持溶液的pH值條件下,進行上述反應。一步法凝膠制備試劑盒(15%)固體試劑的取用:直接傾倒時瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒。
檢測試劑盒的要點有哪些?在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸騰和污染,試劑避免受到微生物的污染,由于蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)過錯的成果。當心汲取試劑并嚴格遵守給定的孵育時刻和溫度。請注意在汲取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,*個孔與后一個孔加樣之間的時刻距離假如太大,將會導致不同的 “預孵育”時刻,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且,洗滌不充分將影響實驗成果。檢測試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,詳細以標簽上的標明為準。
檢測試劑盒樣品收集:血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒液試管。血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,血脂高樣品。組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。PH電極的保護液是為了保持其原有的ph電勢平衡不變。
檢測試劑盒運用注意事項:在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反響時間到30min。反之,則減短反響時間。反響停止液為2M硫酸,防止接觸皮膚。不要運用過了有用日期的檢測試劑盒;也不要運用過了有用期的試劑盒中的任何試劑,摻雜運用過了有用期的檢測試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交流運用不同批號試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個優(yōu)點:吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;穩(wěn)定的重復性和可靠性;靈敏、特異的抗體。檢測試劑盒在檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚。胃蛋白酶抗原修復液
科研實驗中試劑取用應注意事項:讀數(shù)時量筒必須放平穩(wěn)。甲基綠染色液(2%)
鹽酸金霉素溶液(Chlortetracycline,5mg/ml) 簡介: 金 霉 素 (Chlortetracycline) 又 稱 氯 四 環(huán) 素 , 是 Benjamin Dugga 從 Streptomyces aureofaciens 金色鏈霉菌(Streptomyces aureofaciens) 分離出來的一種四環(huán)素類。 CAS 號為 57-,分子量為 478.88。金霉素抑菌原理在于與 tRNA 競爭性結合,從而克制蛋 白質合成。臨床上,金霉素可以用于革蘭陽性菌如金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌的傳染 以及沙眼的治好 組成: 編號 名稱 CA0105 Storage Chlortetracycline solution(5mg/ml) 使用說明書 10ml -20℃ 避光 1份 操作步驟(光供參考): 1、 根據(jù)實驗具體要求操作。 2、 一般工作濃度為 10~50μ g/ml。 注意事項: 1、 注意無菌操作,避免污染。 2、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。甲基綠染色液(2%)