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酶的校正:要滿足在同一方法學(xué)、同一測(cè)定條件、與理論計(jì)算的FACTOR值差異不大,沒有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素,方可 進(jìn)行校正。檢驗(yàn)結(jié)果溯源性,得建立一個(gè)可靠的參考系統(tǒng)作為準(zhǔn)確性基礎(chǔ),然后將準(zhǔn)確性轉(zhuǎn)移到常規(guī)方法測(cè)定中去,使常規(guī)方法測(cè)定結(jié)果可溯源到參考系統(tǒng)所提供的準(zhǔn)確性基礎(chǔ)上來。在實(shí)現(xiàn)溯源性目標(biāo)過程中,永遠(yuǎn)以患者新鮮標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,以方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)方法為驗(yàn)證手段。方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)常采用回歸方程進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,假如斜率接近1,截距較小,這意味著實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法對(duì)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果和溯源目標(biāo)參考系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果非常接近。一般鹽霧標(biāo)準(zhǔn)中要求試驗(yàn)過程中的鹽霧收集液pH值在6.5~7.2之間。Weigert鐵蘇木素染色液
檢測(cè)試劑盒檢測(cè)數(shù)據(jù)的處理步驟:實(shí)驗(yàn)實(shí)在值。從理論上說,樣品中某一組分的含量必定有一個(gè)客觀存在的實(shí)在數(shù)值,稱之為“實(shí)在值”或“真值”。用“μ”表明。但實(shí)踐上,關(guān)于客觀存在的真值,人們不可能的知道,只能隨著丈量技術(shù)的不斷進(jìn)步而逐步挨近真值。實(shí)踐工作中,往往用“標(biāo)準(zhǔn)值”替代“真值”。標(biāo)準(zhǔn)值。檢測(cè)試劑盒選用多種牢靠的剖析辦法、由具有豐富經(jīng)歷的剖析人員通過重復(fù)多次測(cè)定得出的成果平均值,是一個(gè)比較準(zhǔn)確的成果。實(shí)踐工作中一般用標(biāo)準(zhǔn)值替代真值。例如原子量、物理化學(xué)常數(shù):阿佛伽得羅常數(shù)為6.02×10 等。與我們實(shí)驗(yàn)相關(guān)的是將純物質(zhì)中元素的理論含量作為實(shí)在值。鞭毛染色液(Loffler法)固體試劑的取用:直接傾倒時(shí)瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒。
檢測(cè)試劑盒辦法的三大特色表現(xiàn):1.穩(wěn)定性好:包被的抗原的穩(wěn)定性可使檢測(cè)試劑盒的效期得到保證,早期以組成肽為包被抗原的檢測(cè)試劑盒效期只有3-4個(gè)月,選用基因工程抗原后效期很大程度延長了。2.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá),表達(dá)產(chǎn)品包括更多的抗原決定簇,可進(jìn)步檢測(cè)試劑盒的靈敏度,進(jìn)步檢出率。3.分子量大:組成肽選用化學(xué)辦法制備,由于工藝的限制,組成數(shù)量有限,只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸。而使用基因工程制備的抗原,分子量更大。
怎樣減少檢測(cè)試劑盒誤差?檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。洗滌徹底,如若洗板不徹底,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。PH電極的保護(hù)液是為了保持其原有的ph電勢(shì)平衡不變。
G418溶液是什么:G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類 ,這種氨基糖類的結(jié)構(gòu)和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似,在分子遺傳試驗(yàn)中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。它通過克制轉(zhuǎn)座子Tn601,Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生東西,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA ,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以普遍應(yīng)用。溶液配制:G418溶液配制時(shí),一般溶于水配成50mg/ml的原液,使用時(shí)再稀釋使用。在篩選菌類和藻類時(shí),一般用5mg/l 的濃度或者更低。篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞是大可400mg/l的濃度。殺滅曲線的建立:第2天換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。HT Media Supplement(50×)
磷酸緩沖鹽溶液可調(diào)整的適宜pH緩沖作用。Weigert鐵蘇木素染色液
液體培養(yǎng)基接種向肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中接種少量菌體時(shí),其操作步驟基本與斜面接種時(shí)相同,不同之處是挑取菌體的接種環(huán)放入液體培養(yǎng)基后,應(yīng)在液體表面處的管內(nèi)壁上輕輕磨擦,使菌體從環(huán)上脫落,混進(jìn)液體培養(yǎng)基,塞好試管塞后,搖動(dòng)液體,使菌體在液體中分布均勻,或用試管振蕩器混勻。向液體培養(yǎng)基中接種量大或要求定量接種時(shí),可將無菌水或液體培養(yǎng)基注入菌種試管,用接種環(huán)將菌苔刮下,再將菌種懸液以無菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液體培養(yǎng)基。如果菌種為液體培養(yǎng)物,則可用無菌吸管定量吸出加入或直接倒入液體培養(yǎng)基。整個(gè)接種過程都要求無菌操作。Weigert鐵蘇木素染色液