取用液體試劑時要注意什么?從滴瓶中取用液體試劑時,要用滴瓶中的滴管,滴管決不能伸入所用的容器中,以免接觸器壁而沾污藥品。如用滴管從試劑瓶中取少量液體試劑時,則需用附于該試劑瓶的專門滴管取用。裝有藥品的滴管不得橫置或滴管口向上斜放,以免液體流入滴管的橡皮頭中。從細口瓶中取用液體試劑時,用傾注法。先將瓶塞取下,反放在桌面上,手握住試劑瓶上貼標簽的一面,逐漸傾斜瓶子,讓試劑沿著潔凈的試管壁流入試管或沿著潔凈的玻璃棒注入燒杯中。注出所需量后,將試劑瓶口在容器上靠一下,再逐漸豎起瓶子,以免遺留在瓶口的液滴流到瓶的外壁。殺滅曲線的建立:第2天換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。PBST(10×,pH7.4)
pH緩沖溶液的類型與作用:pH緩沖溶液包括兩大類:標準緩沖溶液和普通緩沖溶液。標準緩沖溶液主要用在酸度計測量溶液pH值時的儀器校正和定位,要求數(shù)值準確、精確。因此對試劑純度、濃度準確性、溫度等都有嚴格要求,這類緩沖溶液有專門的化學試劑商品,可以購買配制,也可以用優(yōu)級純試劑按資料的配比配制。普通緩沖溶液主要用于化學分析和儀器分析中要控制一定pH值的測定過程中。幾乎所有的EDTA絡合滴定都必須在一定的pH范圍內(nèi)進行,因此,需要加入pH緩沖溶液,例如,測定鉛、鋅用到HAc緩沖溶液,測定鈣、鎂、鋅用到氨緩沖溶液。又如,氧化還原滴定中,碘量法測銅要用到NH4HF2,碘量法測砷、銻要加NaHCO3。碳酸鋰胭脂紅染色液試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標之一。
樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結(jié)果產(chǎn)生非化學反應的干擾。因此,應根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長或多波長的檢測模式,并在結(jié)果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍,樣品結(jié)果若超過此范圍,分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì),應更換合格試劑。使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點法測定酶活性時,若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍,監(jiān)測期的吸光度將偏離線性,使測定結(jié)果不可靠。
檢測方法的三大特點:穩(wěn)定性好:包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到確保,早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只有3-4個月,選用基因工程抗原后效期很大程度延長了?;蚬こ炭乖瓕⑻禺愋钥乖瓫Q定簇基因融合表達,表達產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇,可提高試劑盒的靈敏度,提高檢出率。分子量大:合成肽選用化學辦法制備,因為工藝的限制,合成數(shù)量有限,只能達到數(shù)百個氨基酸。而使用基因工程制備的抗原,分子量更大。用EDTA2K離心搜集在真空血液搜集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。固體試劑的取用:藥匙每取完一種試劑后都必須用干凈的紙擦拭干凈。
配制ph計的3mol/L的KCL溶液 ph計的ph電極在使用前都是被護套里的保護液保護著,是為了保持其原有的ph電勢平衡不變,為了測量時會更加精確。這里面就是PH電極的保護液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己學會如何配置,使ph電極浸泡在保護液里,這樣就能快速回復其活性,又能很好的測量了。配制ph計保護液——3mol/L的KCL溶液步驟: 1、計算:KCL摩爾質(zhì)量74.5g/moL, 則KCL質(zhì)量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 稱量:用分析天平稱量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在燒杯中用100ml蒸餾水使之完全溶解,并用玻璃棒攪拌; 4、 轉(zhuǎn)移,洗滌:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口較細的。青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。Tris-Tricine陽極緩沖液(5×,pH8.9)
液體試劑可以減少某些藥物的刺激性。PBST(10×,pH7.4)
檢測試劑盒檢測原理:檢測試劑盒為雙抗體夾心法檢測抗原RBD蛋白,酶標板采用高親和力抗RBD蛋白抗體作為包被物,檢測時酶標板孔加入待檢樣品或標準品(哺乳動物重組表達RBD蛋白),再加入生物素化抗RBD蛋白抗體,反應后加入鏈霉親和素HRP,后加入單組份TMB底物液。 如果待檢樣品中含有RBD蛋白,TMB底物液在HRP催化下顯色,加入終止液終止顯色后,在酶標儀OD450/OD630讀取吸光值,吸光值大小與待檢測樣品中RBD蛋白濃度呈正相關,根據(jù)標準品濃度/吸光值繪制的標準曲線,可計算出待檢樣品中RBD蛋白含量。PBST(10×,pH7.4)