DC細(xì)胞誘導(dǎo)：1) 將收集的PBMC在1640培養(yǎng)基，在37 ℃、5 % CO2條件下在培養(yǎng)板培養(yǎng)4h。2) 輕輕吸取上清，收集貼壁細(xì)胞，加入含15%血清，100ng/ml rhGM-CSF、100ng/ml rhIL-4的1640培養(yǎng)基，培養(yǎng)5～7d獲得未成熟DC，用25ng/ml hTNF-α刺激2～3天，獲得成熟DC。3) 用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，至細(xì)胞毛刺樣突起，有典型DC形態(tài)懸浮細(xì)胞。注意事項(xiàng)：細(xì)胞較好在細(xì)胞貼壁注：分離后細(xì)胞較好在貼壁后當(dāng)天換液（貼壁細(xì)胞貼壁能力很弱，潤(rùn)洗時(shí)輕柔），過(guò)夜后部分細(xì)胞漂浮，細(xì)胞得率減少。檢測(cè)試劑盒具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。乙酸凝膠緩沖液(4×)
檢測(cè)檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排加樣。 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。TES緩沖液(10×,pH7.5)在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其溶液pH值變化不大。
紅霉素溶液：紅霉素(Erythromycin)是由紅霉素鏈霉菌(Streptomyces erythreus)所產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類克菌素，分子量為733.93。紅霉素對(duì)革蘭陽(yáng)性菌(如綠色鏈球菌、葡萄球菌、炭疽桿菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌、梭狀芽孢桿菌等)具有很好的克菌性。另外，紅霉素對(duì)某些革蘭陰性菌也有一定的抑菌作用。紅霉素抑菌作用在于其與細(xì)菌的聚核糖體結(jié)合而克制肽鏈的延伸，對(duì)青霉素產(chǎn)生耐藥性的菌株，對(duì)紅霉素敏感。臨床上，紅霉素常用于耐青霉素的金葡菌傳染及對(duì)青霉素過(guò)敏的金葡菌傳染。Leagene Erythromycin solution主要用于科研領(lǐng)域，不用于臨床診斷或其他用途。
PH緩沖液：正常人血漿的pH值為7.35～7.45。血漿PH值的相對(duì)恒定性有賴于血液內(nèi)的緩沖物質(zhì)以及正常的肺、腎功能。血漿的緩沖物質(zhì)包括NaHCO3/H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽/蛋白質(zhì)和Na2HPO4/NaH2PO4三個(gè)主要的緩沖對(duì)，其中以NaHCO3/H2CO3較為重要。紅細(xì)胞內(nèi)還有血紅蛋白鉀鹽/血紅蛋白、氧合血紅蛋白鉀鹽/氧合血紅蛋白、K2HPO4/KH2PO4、KHCO3/H2CO3等緩沖對(duì)參與維持血漿PH值的恒定。當(dāng)酸性或堿性物質(zhì)進(jìn)入血液時(shí)，血漿中的緩沖物質(zhì)可有效的減輕酸或堿性物質(zhì)對(duì)血漿PH值的影響，特別是肺和腎保持正常的排出體內(nèi)過(guò)多的酸或堿的功能的情況下，血漿PH值的波動(dòng)范圍極小。為了避免溶液灑出，同時(shí)不要讓溶液在刻度線上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。
非變性PAGE蛋白上樣緩沖液(2X) (Native Gel Sample Loading Buffer，2X)，, 是一種以溴酚藍(lán)為染料的2倍濃縮液的非變性PAGE蛋白上樣緩沖液，試劑中不含有SDS，DTT?？捎糜诜亲冃缘牡鞍讟悠飞蠘蛹捌渌治觥Ｊ褂谜f(shuō)明：1)按照1份蛋白樣品加入1份非變PAGE蛋白上樣緩沖液(2X)即1：1的比例混合，即可上樣，電泳。2)通常電泳到當(dāng)溴酚藍(lán)染料到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳。注意事項(xiàng)：1)SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(2X)中含少量DTT和巰基乙醇，有輕微刺激性氣味。2)SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(2X)必須完全溶解后再使用。3)為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。固體試劑的取用:瓶塞必須倒放在桌面上【防止藥品腐蝕實(shí)驗(yàn)臺(tái)或污染藥品】。溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)
實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí)，固體只標(biāo)明試劑名稱，液體還須注名明濃度。乙酸凝膠緩沖液(4×)
檢測(cè)試劑盒運(yùn)用注意事項(xiàng):在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15～20min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反響時(shí)間到30min。反之，則減短反響時(shí)間。反響停止液為2M硫酸，防止接觸皮膚。不要運(yùn)用過(guò)了有用日期的檢測(cè)試劑盒；也不要運(yùn)用過(guò)了有用期的試劑盒中的任何試劑，摻雜運(yùn)用過(guò)了有用期的檢測(cè)試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交流運(yùn)用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；靈敏、特異的抗體。乙酸凝膠緩沖液(4×)