Tris-BSA溶液(0.1mol/L

樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此，應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長或多波長的檢測(cè)模式，并在結(jié)果計(jì)算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍，分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí)，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會(huì)超過某一吸光度變化范圍，監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性，使測(cè)定結(jié)果不可靠。檢測(cè)試劑盒控制洗刷量和洗刷次數(shù)的另一種方法是參與過量的洗刷液。Tris-BSA溶液(0.1mol/L,pH7.0)

檢測(cè)試劑盒運(yùn)用注意事項(xiàng):在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15～20min即可。若顏色較淺，可延長反響時(shí)間到30min。反之，則減短反響時(shí)間。反響停止液為2M硫酸，防止接觸皮膚。不要運(yùn)用過了有用日期的檢測(cè)試劑盒；也不要運(yùn)用過了有用期的試劑盒中的任何試劑，摻雜運(yùn)用過了有用期的檢測(cè)試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交流運(yùn)用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；靈敏、特異的抗體。ELISA包被緩沖液(10×)檢測(cè)試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。

檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。所有液體組分使用前充分搖勻。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻檢測(cè)試劑盒里的各種成份及樣品。

檢測(cè)試劑盒樣品收集:血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒液試管。血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，血脂高樣品。組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。丁胺卡那霉素給藥說明：配制靜脈用藥時(shí)，每500mg加入氯化鈉注射液。

檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間建議控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，建議做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。檢測(cè)試劑盒要留心避免出現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。溶出介質(zhì)(EP,pH1.0)

檢測(cè)試劑盒有穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性。Tris-BSA溶液(0.1mol/L,pH7.0)

具體的檢測(cè)試劑盒規(guī)矩說明操作方法：汲取液體時(shí)要選用量程和需求量接近的微量加樣器吸，減少差錯(cuò)。液體悉數(shù)參加酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行悄悄搖晃30s，檢測(cè)試劑盒使液體充沛混合均勻，也使其得到充沛的反應(yīng)。孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板，避免水分蒸騰，以防曲線不成線性。試驗(yàn)前的30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同，酶標(biāo)板只要取出所需量。因?yàn)榈孜镲@色劑對(duì)光及其敏感，因此要避光保存。手工洗板時(shí)每次參加洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，避免交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。Tris-BSA溶液(0.1mol/L,pH7.0)