EA36染色液

非變性PAGE蛋白上樣緩沖液(2X) (Native Gel Sample Loading Buffer，2X)，, 是一種以溴酚藍(lán)為染料的2倍濃縮液的非變性PAGE蛋白上樣緩沖液，試劑中不含有SDS，DTT。可用于非變性的蛋白樣品上樣及其它分析。使用說明：1)按照1份蛋白樣品加入1份非變PAGE蛋白上樣緩沖液(2X)即1：1的比例混合，即可上樣，電泳。2)通常電泳到當(dāng)溴酚藍(lán)染料到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳。注意事項：1)SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(2X)中含少量DTT和巰基乙醇，有輕微刺激性氣味。2)SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(2X)必須完全溶解后再使用。3)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。為保證溶質(zhì)盡可能全部轉(zhuǎn)移到容量瓶中，應(yīng)用蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒并將每次洗滌后的溶液都注入到容量瓶中。EA36染色液

使用方法：1， 固定細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過固定后，適當(dāng)洗滌除去固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，可先進(jìn)行免疫熒光染色，染完畢后再進(jìn)行染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行染色。 2， 對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液，混勻。 3， 室溫染色 5-10 分鐘。 4， 吸除染色液，生理鹽水洗滌 2-3 次，每次 3-5 分鐘。 5， 置于熒光顯微鏡下觀察，激發(fā)波長 360-400nm。 溶液注意事項： dapi 被普遍認(rèn)為具有致性，操作時應(yīng)戴手套，并避免交叉污染。 本產(chǎn)品需避光，并盡量避免反復(fù)凍融。熒光染料都存在淬滅問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。MES buffer(0.1mol/L,pH8.0)殺滅曲線的建立：根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適的濃度梯度。

篩選：篩選之前:由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定G418的適合篩選濃度。具體如下：將細(xì)胞稀釋到1000個細(xì)胞/mL，在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選，選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的低G418濃度來進(jìn)行下一步的篩選試驗。由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同，一般變動在100ug/ml～1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定細(xì)胞對這一批G418的適合篩選濃度。盡管如此，特性明確的細(xì)胞系G418的適合用量還是穩(wěn)定的。《分子克隆》給出了幾個常用細(xì)胞系所需G418的適合用量。

淋巴細(xì)胞亞群及其功能：T淋巴細(xì)胞及其分類主要應(yīng)用抗T細(xì)胞表面抗原McAb.根據(jù)T淋巴細(xì)胞表面分化抗原將成熟T細(xì)胞分為CD4+、CD8-和CD4-、CD8+兩大亞群，T淋巴細(xì)胞的功能與表現(xiàn)型之間的對應(yīng)關(guān)系是相對的，其免疫活性可能受“微環(huán)境”的影響，并受MHC抗原的制約，許多研究證明，CD4+T細(xì)胞具有殺傷活性，介導(dǎo)Ι類抗原不相容時的靶細(xì)胞溶解。TU等研究表明，CD4+的細(xì)胞毒活性存在兩種完全不同的機理，并證明TH1和TH2的細(xì)胞毒活性不同。前者強，后者弱或無活性。Dennert等發(fā)現(xiàn)，克隆化的T淋巴細(xì)胞具有輔助，細(xì)胞毒活性和遲發(fā)型超敏反應(yīng)作用，這種功能的多樣性有賴于所采用的分析方法。CD4+細(xì)胞識別Ι類MHC抗原，其效應(yīng)的發(fā)揮也受Ι類抗原的制約；CD3+細(xì)胞識別Ι類MHC抗原，發(fā)揮免疫效應(yīng)也受其控制。但若加入酸，堿的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。

具體的檢測試劑盒規(guī)矩說明操作方法：要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性，能夠運用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確認(rèn)(因為蒸餾水不含雜質(zhì)，溫度環(huán)境為20%左右時，lmL的水能夠看作是lg、200L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其高量程和低量程進(jìn)行確認(rèn)。在運用微量加樣器時，汲取不同瓶子中液體后要更換頭，即便汲取規(guī)范品溶液。汲取液體時速度不易太快，以免發(fā)生氣泡，汲取的量不夠準(zhǔn)確。將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免頭和孔內(nèi)液體觸摸，可使頭上的液滴和孑L壁觸摸，液滴會自然流下去。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔，避免因為頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而形成的差錯。校準(zhǔn)液標(biāo)示值往往是按其基質(zhì)偏差修正的，所以標(biāo)示值并非實際值。CPD抗凝粉劑

科研實驗中試劑取用應(yīng)注意事項：余下部分用膠頭滴管滴加藥液至所需刻度線。EA36染色液

PCR檢測試劑盒簡介:耐熱聚合酶PCR技術(shù)為綜合了兩項技術(shù)的實用性極強的DNA體外復(fù)制技術(shù).1、DNA模板與引物間的熱變性與復(fù)性技術(shù)；實現(xiàn)在成千上萬的DNA序列中尋找鎖定目標(biāo)片段位置。2、耐熱DNA聚合酶技術(shù)；實現(xiàn)耐受高溫并對鎖定位置的DNA的快速準(zhǔn)確的聚合。為了滿足教學(xué)和科研的要求，本公司為您提供了可以擴增特定大小產(chǎn)物的PCR反應(yīng)檢測試劑盒。包括500bp～1000bp大小的PCR產(chǎn)物。本檢測試劑盒含有完成PCR反應(yīng)的全部試劑。提供清晰準(zhǔn)確的PCR擴增效果，確保實驗順利進(jìn)行。該反應(yīng)體系中Taq DNA聚合酶的*延伸溫度為70～75℃。Taq酶的延伸速度為1～2 kb/min。EA36染色液