CTAB沉淀液

配制ph計(jì)的3mol/L的KCL溶液 ph計(jì)的ph電極在使用前都是被護(hù)套里的保護(hù)液保護(hù)著，是為了保持其原有的ph電勢(shì)平衡不變，為了測(cè)量時(shí)會(huì)更加精確。這里面就是PH電極的保護(hù)液，即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己學(xué)會(huì)如何配置，使ph電極浸泡在保護(hù)液里，這樣就能快速回復(fù)其活性，又能很好的測(cè)量了。配制ph計(jì)保護(hù)液——3mol/L的KCL溶液步驟： 1、計(jì)算：KCL摩爾質(zhì)量74.5g/moL, 則KCL質(zhì)量＝3mol×74.5g/mol=223.5g； 2、 稱量：用分析天平稱量KCL=223.5g，注意分析天平的使用； 3、 溶解：在燒杯中用100ml蒸餾水使之完全溶解，并用玻璃棒攪拌； 4、 轉(zhuǎn)移，洗滌：把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶，用容量瓶瓶口較細(xì)的。在試管里進(jìn)行某些實(shí)驗(yàn)時(shí)，取試劑不需要準(zhǔn)確用量，只要學(xué)會(huì)估計(jì)取用液體的量即可。CTAB沉淀液

緩沖溶液的緩沖能力：在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時(shí)，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· 　 L-1NaAc組成的緩沖溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大，否則，不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí)，緩沖作用減小，緩沖能力降低，當(dāng)c（鹽）/c（酸）為1∶1時(shí)△pH較小，緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計(jì)算：此時(shí)緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠(yuǎn)，緩沖能力愈小，甚至不能起緩沖作用。對(duì)于任何緩沖體系，存在有效緩沖范圍，這個(gè)范圍大致在pKaφ（或pKbφ）兩側(cè)各一個(gè)pH單位之內(nèi)。溶出介質(zhì)(EP,pH2.0)當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用。

檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)有哪些？正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。在實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括：固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。

我們?cè)跈z測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中，有時(shí)會(huì)遇到樣品濃度挨近檢測(cè)試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的結(jié)果。首先我們要知道什么是基質(zhì)，基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會(huì)對(duì)分析過程有明顯干擾，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是檢測(cè)試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢？當(dāng)單個(gè)樣本或少量樣本值低于空白值時(shí)，可能是實(shí)驗(yàn)操作出現(xiàn)問題，這時(shí)應(yīng)增加重復(fù)，進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時(shí)，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改?；|(zhì)效應(yīng)的原因錯(cuò)綜復(fù)雜，有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無(wú)法計(jì)算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。固體試劑的取用:取固體量較多時(shí)用大匙,較少時(shí)用小匙。

食品檢測(cè)檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排加樣。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。校準(zhǔn)液標(biāo)示值往往是按其基質(zhì)偏差修正的，所以標(biāo)示值并非實(shí)際值。三羥甲基氨基甲烷緩沖液（pH8.0）

PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑。CTAB沉淀液

淋巴細(xì)胞分離液：淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異，借助離心產(chǎn)生的重力加速度，進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細(xì)胞分離液有Ficoll淋巴細(xì)胞分離液、Percoll淋巴細(xì)胞分離液。Ficoll與Percoll分離單個(gè)核細(xì)胞的方法均為密度梯度離心法。分離原理：外周血中單個(gè)核細(xì)胞和單核細(xì)胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同，淋巴細(xì)胞分離液是一種密度介于1.075~1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將各種血細(xì)胞加以分離。淋巴細(xì)胞分離液Lymphocyte Separation Medium（human, Ficoll-Paque ）是世界范圍內(nèi)用于體外研究分離人淋巴細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)室公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)。CTAB沉淀液