BCA蛋白檢測(cè)試劑盒是進(jìn)行蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的常見(jiàn)的方法之一。BCA蛋白定量的主要原理是:蛋白質(zhì)在堿性條件下,可以將二價(jià)Cu2+離子還原成一價(jià)Cu+離子。產(chǎn)生的一價(jià)Cu+離子可以與BCA(Bicinchoninicacid)試劑結(jié)合,終生成紫色的復(fù)合物。該復(fù)合物在562nm處有很強(qiáng)的吸收峰。復(fù)合物的多少與蛋白質(zhì)的濃度呈接近的線(xiàn)性關(guān)系。BCA蛋白檢測(cè)試劑盒有許多優(yōu)點(diǎn):檢測(cè)的靈敏度高,檢測(cè)的蛋白質(zhì)濃度下限可達(dá)20μg/mL。線(xiàn)性范圍廣,在20-2000μg/mL的范圍內(nèi),呈接近的線(xiàn)性關(guān)系。兼容性良好,產(chǎn)品可以兼容的化學(xué)物質(zhì)非常普遍。丁胺卡那霉素給藥說(shuō)明:配制靜脈用藥時(shí),每500mg加入氯化鈉注射液。耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選:1、轉(zhuǎn)染48 h后,用含適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷效果較好。但細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低,較好將細(xì)胞稀釋至豐度低于25%。2、每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。3、篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間(取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果)。4、挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。5、后續(xù)更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液(BSA,10mg/ml)BMC原代分離步驟:吸取稀釋血液,在離分層液上方1cm處,沿試管壁徐徐加入。
利福平在血液中75%~80%與血漿白蛋白結(jié)合,在組織分布普遍,易滲入機(jī)體組織、體液(包括腦脊液)中。利福平在肝臟代謝,代謝物主要是脫乙酰利福平。體內(nèi)藥物多自膽汁中排泄,約1/3藥物由尿中排泄。利福平的代謝產(chǎn)物呈橘紅色,因而尿、糞便、唾液、眼淚和汗等也帶紅色。利福平對(duì)肝臟有毒性作用,可致肝酶、膽紅素升高。該品可加速異煙冊(cè)代謝為乙酰胺而加強(qiáng)肝毒性。原有肝病者更易引起肝損害,當(dāng)肝儲(chǔ)備功能已經(jīng)嚴(yán)重受損時(shí)服用利福平可致死亡。利福平偶可致血細(xì)胞改變及腎臟損害。部分患者服用后產(chǎn)生胃腸道反應(yīng),少數(shù)患者對(duì)利福平過(guò)敏,利福平與其他之間無(wú)交叉過(guò)敏反應(yīng)。
檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)為什么要設(shè)置復(fù)孔?計(jì)算平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確;解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;計(jì)算CV值,對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作和檢測(cè)試劑盒的精密度進(jìn)行評(píng)估。加樣要準(zhǔn)確、快速。如果加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,檢測(cè)試劑盒直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。配制ph計(jì)的3mol/L的KCL溶液 ph計(jì)的ph電極在使用前都是被護(hù)套里的保護(hù)液保護(hù)著。
科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):1. 取用少量的液體—使用膠頭滴管a. 應(yīng)在容器的正上方垂直滴入;膠頭滴管不要接觸容器壁【防止沾污試管或污染試劑】;b. 取液后的滴管,應(yīng)保持橡膠膠帽在上,不要平放或倒置【防止液體倒流,沾污試劑或腐蝕橡膠膠帽】;c. 用過(guò)的試管要立即用清水沖洗干凈;但滴瓶上的滴管不能用水沖洗,也不能交叉使用。2. 取用一定量的液體—使用量筒a. 當(dāng)向量筒中傾倒液體接近所需刻度時(shí),停止傾倒,余下部分用膠頭滴管滴加藥液至所需刻度線(xiàn);b. 讀數(shù)時(shí)量筒必須放平穩(wěn),視線(xiàn)與量筒內(nèi)液體的凹液面的低處保持水平。PH電極的保護(hù)液為了測(cè)量時(shí)會(huì)更加精確。尿素(Urea)檢測(cè)試劑盒(脲酶波氏微板法)
檢測(cè)試劑盒是經(jīng)過(guò)酶聯(lián)免疫吸附反響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)特定物質(zhì)的檢測(cè)試劑盒。耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基
Laemmli 加樣緩沖液(2×)是一種以溴酚藍(lán)為染料的 2 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液,主要 由 2-ME、SDS、溴酚藍(lán)、Laemmli 分層緩沖液等組成,可用于不連續(xù)蛋白電泳的上樣。 組成: 編號(hào) 名稱(chēng) PE0005 5ml Storage Laemmli 加樣緩沖液(2×) 使用說(shuō)明書(shū) 4℃ 1份 操作步驟(光供參考): 1、 取適量的蛋白樣品和 Laemmli 加樣緩沖液(2×)等量混合,充分混勻。 2、 直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內(nèi)即可。 3、 通常電泳至藍(lán)色染料到達(dá) PAGE 膠的底部附近即可停止。 注意事項(xiàng): 1、 Leagene Laemmli 加樣緩沖液(2×)中含少量β-巰基乙醇,有輕微刺激性氣味。 2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 個(gè)月有效。亦可室溫短期保存。耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基