芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)

DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料,常用熒光顯微鏡觀測,可以透過完整的細(xì)胞膜,可用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色,其工作濃度一般為0.3mmol/L或0.1ug/ml。顯微鏡下可以看到藍(lán)色熒光的細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記的效率高 ,且對活細(xì)胞無毒副作用。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的大激發(fā)波長為340nm,大發(fā)射波長為488nm, DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長為360nm,大發(fā)射波長為460nm。檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)

用液體試劑時要注意什么？在試管里進(jìn)行某些實(shí)驗(yàn)時，取試劑不需要準(zhǔn)確用量，只要學(xué)會估計(jì)取用液體的量即可。例如用滴管取用液體，lmL相當(dāng)多少滴，5mL液體占一個試管容量的幾分之幾等。倒入試管里溶液的量，一般不超過其容積的1/3。定量取用液體時，用量筒或移液管。量筒用于量度一定體積的液體，可根據(jù)需要選用不同容量的量筒。量取液體后讀數(shù)時，要使視線與量筒內(nèi)液體的彎月面的低處保持水平，偏高或偏低都會讀不準(zhǔn)而造成較大的誤差。芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)見光易分解的試劑（如硝酸銀）應(yīng)裝在棕色瓶中。

檢測檢測試劑盒注意事項(xiàng)：檢測檢測試劑盒保存在2-8℃，運(yùn)用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗刷液會有結(jié)晶，這歸于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶徹底溶解后再運(yùn)用。試驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。嚴(yán)厲按照闡明書中標(biāo)明的時刻、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分運(yùn)用前充分搖勻。檢測檢測試劑盒搜集：標(biāo)本搜集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，若不能馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)防止反復(fù)凍融。

緩沖溶液的配制和應(yīng)用：為了配制一定pH的緩沖溶液，首先選定一個弱酸，它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值，然后計(jì)算酸與堿的濃度比，根據(jù)此濃度比便可配制所需緩沖溶液。以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計(jì)算和配制方法。對于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。緩沖溶液在物質(zhì)分離和成分分析等方面應(yīng)用普遍，如鑒定Mg2 離子時，可用下面的反應(yīng)：白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸，故反應(yīng)需在堿性溶液中進(jìn)行，但堿性太強(qiáng)，可能生成白色Mg（OH）2沉淀，所以反應(yīng)的pH值需控制在一定范圍內(nèi)，因此利用NH3·H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液，保持溶液的pH值條件下，進(jìn)行上述反應(yīng)。殺滅曲線的建立：根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適的濃度梯度。

試劑盒的原理：根底是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶符號的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。再參加酶符號的抗原或抗體，也通過反響而結(jié)合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)品，產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。氨芐青霉素溶液配置：加入40ml滅菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。Tris鎂鹽緩沖液(1×,pH7.8)

外用液體試劑系指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的。芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)

從試劑瓶取用試劑，用左手持量筒（或試管），并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶（注意：試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽），慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時，視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平。倒完后，應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下，再將瓶子豎直，以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子，取出后應(yīng)倒置桌上，如瓶塞頂不是扁平的，可用食指和中指（或中指和無名指）醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理將瓶塞夾?。ɑ蚍旁跐崈舻谋砻婷笊希?，切不可將它橫置桌上。取用試劑后應(yīng)立即蓋上原來的瓶塞，把試劑瓶放回原處，并使試劑標(biāo)簽朝外，應(yīng)根據(jù)所需用量取用試劑，不必多取，如不慎取出了過多的試劑，只能棄去，不得倒回或放回原瓶。以免沾污試劑。芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)

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