篩選:篩選之前:由于每種細胞對G418的敏感性不同,而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定G418的適合篩選濃度。具體如下:將細胞稀釋到1000個細胞/mL,在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內(nèi)進行篩選,選擇出在10~14天內(nèi)使細胞全部死亡的低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。由于每種細胞對G418的敏感性不同,一般變動在100ug/ml~1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定細胞對這一批G418的適合篩選濃度。盡管如此,特性明確的細胞系G418的適合用量還是穩(wěn)定的?!斗肿涌寺 方o出了幾個常用細胞系所需G418的適合用量。氨芐青霉素溶液配置:稱取5g Ampicillin置于50ml塑料離心管中。SSC緩沖粉劑(20×)
溶故配制注意事項:1.藥品要有較好的質(zhì)皿試劑分為優(yōu)級純(保證試劑,Guaranteed reagent,G.R.),分析試劑(Antalytical reagent, A. R.)化學(xué)純(Chemical pure,C. P.)和實驗試劑(Laboratory reagent, L. R.)等等?;瘜W(xué)試劑,雜質(zhì)較多。只在個別情況下應(yīng)用。如配洗液用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2.藥品稱且要精確。3.配制試劑用水應(yīng)用新鮮的去離子水或雙蒸餾水,比電閉值在50萬歐姆以上,PH在5.5-7.0之間才可應(yīng)用,在組織培養(yǎng)等特殊用途時應(yīng)注意此頂要求。配制一般化9k用溶液只要求用雙燕蒸餾水或去離子水.4.配好后的溶液,應(yīng)立即除菌處理(如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì)),以防雜菌生長。非特異結(jié)合性封閉液科研實驗中試劑取用應(yīng)注意事項:視線與量筒內(nèi)液體的凹液面的低處保持水平。
氨芐青霉素為白色晶體或粉末,分子式是C16H19N3O4S,分子量為349.41。溶于稀酸和稀堿,微溶于水和甲醇,幾乎不溶于氯仿、96%乙醇、、乙酸乙酯和固定油。無臭,味苦??垢锾m氏陽性及陰性菌,用于分子生物學(xué)和組織培養(yǎng)(防止微生物污染和抗性篩選)。氨芐青霉素時常被用于分子生物學(xué)上,作為細菌(如大腸桿菌)吸收基因(如質(zhì)粒)的測試。測試會將一組基因,連同已編碼抗氨芐青霉素的基因插入細菌中。該細菌會被放于充滿氨芐青霉素的環(huán)境下培育,直至成功制造卞所需的基因。
hochest染色和DAPI染色有什么區(qū)別:1、每個染料有自己獨特的激發(fā)譜線和發(fā)射譜線.這也是以上兩個染料的主要區(qū)別. 另外Hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細胞時候能輕松進入;DAPI是半透性的,有選擇性的進入.因此Hoechest 33258 一般用來染活細胞,可以長驅(qū)直入;DAPI一般是染固定細胞.2、兩者都可以用紫外看,參見以下的激發(fā)發(fā)射波長Hoechst 33258的較大激發(fā)波長為346nm,較大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長為352nm,較大發(fā)射波長為461nm。DAPI的較大激發(fā)波長為340nm,較大發(fā)射波長為488nm;DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長為364nm,較大發(fā)射波長為454nm。科研實驗中試劑取用應(yīng)注意事項:滴瓶上的滴管不能用水沖洗,也不能交叉使用。
檢測試劑盒檢測原理:檢測試劑盒為雙抗體夾心法檢測抗原RBD蛋白,酶標板采用高親和力抗RBD蛋白抗體作為包被物,檢測時酶標板孔加入待檢樣品或標準品(哺乳動物重組表達RBD蛋白),再加入生物素化抗RBD蛋白抗體,反應(yīng)后加入鏈霉親和素HRP,后加入單組份TMB底物液。 如果待檢樣品中含有RBD蛋白,TMB底物液在HRP催化下顯色,加入終止液終止顯色后,在酶標儀OD450/OD630讀取吸光值,吸光值大小與待檢測樣品中RBD蛋白濃度呈正相關(guān),根據(jù)標準品濃度/吸光值繪制的標準曲線,可計算出待檢樣品中RBD蛋白含量。PBS:PBS粉劑每袋加ddH2O定容至1000mL,調(diào)pH7.2,高壓滅菌,4℃保存?zhèn)溆?。非特異結(jié)合性封閉液
檢測試劑盒吸附性能好。SSC緩沖粉劑(20×)
取用液體試劑時要注意什么?從滴瓶中取用液體試劑時,要用滴瓶中的滴管,滴管決不能伸入所用的容器中,以免接觸器壁而沾污藥品。如用滴管從試劑瓶中取少量液體試劑時,則需用附于該試劑瓶的專門滴管取用。裝有藥品的滴管不得橫置或滴管口向上斜放,以免液體流入滴管的橡皮頭中。從細口瓶中取用液體試劑時,用傾注法。先將瓶塞取下,反放在桌面上,手握住試劑瓶上貼標簽的一面,逐漸傾斜瓶子,讓試劑沿著潔凈的試管壁流入試管或沿著潔凈的玻璃棒注入燒杯中。注出所需量后,將試劑瓶口在容器上靠一下,再逐漸豎起瓶子,以免遺留在瓶口的液滴流到瓶的外壁。SSC緩沖粉劑(20×)
上海源葉生物科技有限公司發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大,現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團隊,各種專業(yè)設(shè)備齊全。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展源葉,Fifan,Medmol的品牌。我公司擁有強大的技術(shù)實力,多年來一直專注于許可項目:危險化學(xué)品經(jīng)營。(依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準文件或許可證件為準) 一般項目:生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)服務(wù),植物提取物領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)研究、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,批發(fā)實驗設(shè)備及耗材、儀器儀表、化工原料及產(chǎn)品、電子產(chǎn)品、塑料制品、金屬制品,從事各類生化試劑(不含危險化學(xué)品、易制毒化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品)的研發(fā)、分裝及銷售,貨物或技術(shù)進出口(國家禁止或涉及行政審批的貨物和技術(shù)進出口除外)。(除依法須經(jīng)批準的項目外,憑營業(yè)執(zhí)照依法自主開展經(jīng)營活動)的發(fā)展和創(chuàng)新,打造高指標產(chǎn)品和服務(wù)。自公司成立以來,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽求發(fā)展”的經(jīng)營理念,始終堅持以客戶的需求和滿意為重點,為客戶提供良好的生化試劑透析袋,標準品,液體試劑,抑制劑,從而使公司不斷發(fā)展壯大。