病毒采樣管由拭子+采樣管+病毒保存液三部分構(gòu)成。病毒保存液包括Hank's液基礎(chǔ)、慶大霉素、、BSA (V)、冷凍保護(hù)劑、生物緩沖劑和氨基酸。在Hank's基礎(chǔ)之上,添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五組分)等病毒穩(wěn)定成分,可在較寬的溫度范圍內(nèi)維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽性率。
病毒保存液的質(zhì)量,是提高PCR檢測陽性率與病毒分離陽性率的關(guān)鍵因素,從根本上決定了病毒采樣管的質(zhì)量。添加常溫穩(wěn)定的類,可解決采樣后的霉菌污染問題,實(shí)現(xiàn)采樣液的常溫保存。 我們在病毒采樣后并不是都能在樣本采集處進(jìn)行運(yùn)輸和保存的因此我們就需要對采集的病毒拭子進(jìn)行運(yùn)輸和保留。深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
一次性使用病毒采樣管(滅活型)的特點(diǎn):
①、操作使用簡單,無需配液,體系內(nèi)含有高效病毒裂解液,采樣后即刻滅活病毒,有效防止二次風(fēng)險,保障運(yùn)輸及檢測人員安全
②、病毒DNA/RNA可在常溫保存與運(yùn)輸1周不降解,按大多數(shù)商業(yè)化試劑盒進(jìn)行提取后,獲得的DNA或者是RNA質(zhì)量好,得率高,可完成各種基因檢測及分析實(shí)驗(yàn),如PCR或者是qPCR等,同時節(jié)省運(yùn)輸成本
③、內(nèi)含核酸RNA酶抑制劑,很大程度保護(hù)病毒核酸穩(wěn)定不被降解,大幅提高核酸提取效率。適用于、流感病毒、手足口病毒等常見的病毒樣本采集保存運(yùn)輸工作,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本,儲存的樣本可用于后續(xù)的核酸提取或者純化等臨床試驗(yàn)。 血液保存液品牌企業(yè)對于不同的檢測目的,需要使用不同的病毒保存液,以及不同的病毒檢測實(shí)驗(yàn)條件所以分成了滅活型和非滅活型。
市場上使用的病毒保存液主要有兩種,一種是以運(yùn)送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液,另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)液(MEM)或Hank's平衡鹽,添加了病毒生存所需的鹽類、氨基酸、維生素、葡萄糖以及蛋白質(zhì),這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑,溶液pH值在6.6-8.0時溶液呈粉紅色。保存液中添加了必須的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以穩(wěn)定病毒的蛋白質(zhì)外殼。由于保存液營養(yǎng)成分豐富,有利于病毒的成活但是也有利于細(xì)菌的生長,如果保存液中污染了細(xì)菌,則會大量繁殖,其代謝產(chǎn)物中的二氧化碳會使保存液pH值下降,從粉紅色變?yōu)辄S色。因而大多數(shù)廠家都在配方中添加了抑菌劑成分,推薦使用的抑菌劑為青霉素、鏈霉素、慶大霉素及多粘菌素B等,不推薦使用疊氮鈉、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制劑,因?yàn)檫@些組分對PCR反應(yīng)有影響。由于這種保存液提供的樣本基本是活病毒,可以很大程度保持樣本的原始性,后續(xù)不僅可以用于病毒的核酸提取檢測,還能用于病毒的培養(yǎng)和分離。但是用于檢測時應(yīng)該注意的是必須滅活以后再進(jìn)行核酸提取純化。
非滅活型的病毒采樣管:
除了滅活型的病毒保存液,保存的病毒完整性更好,檢出率更高,出了核酸檢測外還可以用于其他研究。
滅活型病毒保存液則使用上更安全,操作環(huán)境要求也不用那么嚴(yán)格,各有各的優(yōu)勢,目前研究的非滅活病毒保存液的成分主要為Hank’s液基礎(chǔ),在這個基礎(chǔ)上,添加了氯化鉀,氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供必須的營養(yǎng)離子使之專一性更強(qiáng)、且保存時間更長,更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌提取率。
非滅活型的一次性病毒采樣管的特點(diǎn):
①、低溫非凍型保存,不破壞病毒的外殼,方便長途運(yùn)輸。
②、適用于各種拭子樣品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子等。
③、保存液中添加了氯化鉀、氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供了必須的營養(yǎng)離子,使病菌專一性更強(qiáng)、且保存時間更長,可以更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌的提取率。
④、保存液中的成分可以有效防止細(xì)菌和污染。 病毒保存液主要適用于****、手足口病毒、流感病毒等常見的病毒樣本采集保存運(yùn)輸工作。
病毒采樣管是一種通用的采樣產(chǎn)品,可以快速滅活病毒,可以保證檢測人員的風(fēng)險還避免了氣溶膠的風(fēng)險。還可以用于各種病毒樣品、衣原體樣品包括近肆虐全球的原樣品的取樣,可以進(jìn)行2~8天的短期儲存和運(yùn)輸,在-70℃或液氮環(huán)境中長期儲存。如果需要長途運(yùn)輸,建議使用冷鏈運(yùn)輸,避免采樣管的樣本錯過了檢測的比較好時期。
病毒采樣管用于臨床流感、禽流感、手足口病、麻疹、等病毒標(biāo)本和支原體、解脲支原體、衣原體等標(biāo)本的采集和運(yùn)輸,可以有效的滅活病毒,避免氣溶膠的風(fēng)險 從采集完樣品到開始檢測,中間可能遇到各種問題,比如異地運(yùn)輸或郵寄標(biāo)本。深圳衣原體保存液
病毒保存液是一種采樣管內(nèi)浸沒采樣拭子病毒標(biāo)本的一種保護(hù)病毒的被檢測物質(zhì)的液體。深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
滅活型病毒保存液的原理:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測樣本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作員二次,同時又含有Rnase酶抑制劑,能保護(hù)病毒核酸不被降解,后續(xù)的實(shí)驗(yàn)只要能檢測出病毒的核酸即可以做出診斷。而且能在常溫下保存相對較長的時間,節(jié)省了病毒樣品保存以及運(yùn)輸?shù)某杀尽?
非滅活型病毒保存液的原理:
它同時保留了病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者RNA,這樣就可以保證病毒樣本核酸在送檢過程中的完整性,雖然操作失誤時會也有一定的性風(fēng)險,但是這種保存液很大程度地保持了病毒樣本的原始性,是一種培養(yǎng)型的病毒運(yùn)輸介質(zhì),需要注意的是采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫保存。
深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
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