非滅活型的病毒采樣管:
除了滅活型的病毒保存液,保存的病毒完整性更好,檢出率更高,出了核酸檢測外還可以用于其他研究。
滅活型病毒保存液則使用上更安全,操作環(huán)境要求也不用那么嚴格,各有各的優(yōu)勢,目前研究的非滅活病毒保存液的成分主要為Hank’s液基礎,在這個基礎上,添加了氯化鉀,氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供必須的營養(yǎng)離子使之專一性更強、且保存時間更長,更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌提取率。
非滅活型的一次性病毒采樣管的特點:
①、低溫非凍型保存,不破壞病毒的外殼,方便長途運輸。
②、適用于各種拭子樣品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子等。
③、保存液中添加了氯化鉀、氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供了必須的營養(yǎng)離子,使病菌專一性更強、且保存時間更長,可以更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌的提取率。
④、保存液中的成分可以有效防止細菌和污染。 其實也就是非滅活型的病毒保存液,導致采樣、運輸和檢測中的醫(yī)護人員均面臨較高的風險。重慶病毒保存液****
病毒采樣管由拭子+采樣管+病毒保存液三部分構(gòu)成。病毒保存液包括Hank's液基礎、慶大霉素、、BSA (V)、冷凍保護劑、生物緩沖劑和氨基酸。在Hank's基礎之上,添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五組分)等病毒穩(wěn)定成分,可在較寬的溫度范圍內(nèi)維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽性率。
病毒保存液的質(zhì)量,是提高PCR檢測陽性率與病毒分離陽性率的關(guān)鍵因素,從根本上決定了病毒采樣管的質(zhì)量。添加常溫穩(wěn)定的類,可解決采樣后的霉菌污染問題,實現(xiàn)采樣液的常溫保存。 陜西一次性使用病毒保存管保存液價格實惠由于病毒屬于寄生生物,采樣后體外就無法存活了,如果不能及時檢測,就需要放入病毒保存液中進行保存。
病毒采樣管-適用于、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒標本以及支原體、脲原體、衣原體標本的采集及運送。病毒及相關(guān)樣本的冷藏狀態(tài)下(2-8℃)的48小時內(nèi)保存與運輸。病毒及相關(guān)樣本的-80℃環(huán)境或液氮環(huán)境中的長時間保存。
病毒采樣管搜集病毒的采樣方法
1、先用壓舌板壓住舌頭,然后將采樣拭子頭部伸入咽喉部位擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,輕度用力拭抹咽后壁部位,應避免觸及舌部。
2、以拭子測量鼻尖到耳垂的距離并用手指做標記,將采樣拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子伸入距離少應達耳垂部位到鼻尖長度的一半,使拭子在鼻內(nèi)停留15-30秒,輕輕旋轉(zhuǎn)3-5次,抽出拭子。
滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液體含有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測樣本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同時又含有Rnase酶抑制劑,能保護病毒核酸不被降解,后續(xù)的NT-PCR實驗只要能檢測出病毒的核酸既可以做出診斷。而且能夠在常溫下保存相對較長的時間。
病毒的檢測不同于常規(guī)的生化檢測,病毒本身是一種結(jié)構(gòu)簡單的微生物,必須 寄生在活細胞內(nèi)。采樣后,病毒離開寄主細胞,在采樣管內(nèi)其蛋白質(zhì)外殼和核酸都會很快降解,這樣核酸檢測時就無法判斷初始采集的樣本是否含有病毒,容易造成假陰性。 比如異地運輸或郵寄標本,或樣品太多無法按時進行檢測等等,這時病毒保存液就起到了相當大的作用。
滅活型保存液:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。能有效阻止操作員二次,但是又含有Rnase抑制劑,能保護病毒核酸不被降解,從而使后續(xù)能通過NT-PCR進行檢測。而且能在常溫下保存相對較長的時間,節(jié)省了病毒樣本保存以及運輸?shù)某杀尽?
非滅活型保存液:
主要是以運送培養(yǎng)基為基礎改良的病毒維持型保存液。它能夠保持病毒在外的活性以及抗原和核酸的完整性,含有Hanks液等,保護病毒蛋白外殼不易分解,較大程度地保持了病毒樣本的原始性。這種保存液除了用于核酸提取檢測外,還能用于病毒的培養(yǎng)、分離以及抗原的檢測等,但是采樣后長時間保存需要保持嚴格低溫。
可見根據(jù)不同的情況,不同類型的保存液有著各自的優(yōu)缺點,但是需要注意的是:不管是滅活型還是非滅活型,在采樣之前的病毒采樣管都必須嚴格滅活殺菌,保證管內(nèi)沒有其他微生物,致使采樣后病毒分解或其他影響造成錯誤檢測。 為了保護病毒檢測環(huán)境的安全和檢測人員的安全,滅活病毒保存液其實是比較好的選擇。中國病毒保存管病毒保存液價目表
病毒保存液是一種采樣管內(nèi)浸沒采樣拭子病毒標本的一種保護病毒的被檢測物質(zhì)的液體。重慶病毒保存液****
制造保存管的材質(zhì)應注意選擇,有資料提示聚丙烯(Polypropylene)與核酸的吸附有關(guān),特別是在高張力離子濃度時,聚乙烯塑料(Polyethylene)比聚丙烯(Polypropylene)更容易抓住DNA/RNA。聚乙烯-丙烯聚合物(Polyallomer)塑膠與某些特殊處理的聚丙烯(Polypropylene)塑膠容器更適合做DNA/RNA的儲存使用。另外,在使用可折斷拭子時,保存管應盡量選擇高度大于8厘米的容器,以防止在折斷拭子時內(nèi)容物外濺污染。
生產(chǎn)保存液的水:生產(chǎn)保存液使用的超純水應經(jīng)過分子量為13,000的超濾膜過濾,以保證去除生物來源的聚合物雜質(zhì),例如RNase、DNase和內(nèi),不推薦使用普通純化水或蒸餾水。 重慶病毒保存液****
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