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市場(chǎng)上使用的病毒保存液主要有兩種,一種是以運(yùn)送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液,另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)液(MEM)或Hank's平衡鹽,添加了病毒生存所需的鹽類、氨基酸、維生素、葡萄糖以及蛋白質(zhì),這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑,溶液pH值在6.6-8.0時(shí)溶液呈粉紅色。保存液中添加了必須的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以穩(wěn)定病毒的蛋白質(zhì)外殼。由于保存液營(yíng)養(yǎng)成分豐富,有利于病毒的成活但是也有利于細(xì)菌的生長(zhǎng),如果保存液中污染了細(xì)菌,則會(huì)大量繁殖,其代謝產(chǎn)物中的二氧化碳會(huì)使保存液pH值下降,從粉紅色變?yōu)辄S色。因而大多數(shù)廠家都在配方中添加了抑菌劑成分,推薦使用的抑菌劑為青霉素、鏈霉素、慶大霉素及多粘菌素B等,不推薦使用疊氮鈉、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制劑,因?yàn)檫@些組分對(duì)PCR反應(yīng)有影響。由于這種保存液提供的樣本基本是活病毒,可以很大程度保持樣本的原始性,后續(xù)不僅可以用于病毒的核酸提取檢測(cè),還能用于病毒的培養(yǎng)和分離。但是用于檢測(cè)時(shí)應(yīng)該注意的是必須滅活以后再進(jìn)行核酸提取純化。
除了用于核酸提取檢測(cè)外,還能用于病毒的培養(yǎng)分離以及抗原的檢測(cè)等但是采樣后長(zhǎng)時(shí)間保存需要保持嚴(yán)格低溫?;葜莶《颈4婀懿《颈4嬉菏裁磧r(jià)格
病毒采樣管由拭子+采樣管+病毒保存液三部分構(gòu)成。病毒保存液包括Hank's液基礎(chǔ)、慶大霉素、、BSA (V)、冷凍保護(hù)劑、生物緩沖劑和氨基酸。在Hank's基礎(chǔ)之上,添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五組分)等病毒穩(wěn)定成分,可在較寬的溫度范圍內(nèi)維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽(yáng)性率。
病毒保存液的質(zhì)量,是提高PCR檢測(cè)陽(yáng)性率與病毒分離陽(yáng)性率的關(guān)鍵因素,從根本上決定了病毒采樣管的質(zhì)量。添加常溫穩(wěn)定的類,可解決采樣后的霉菌污染問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)采樣液的常溫保存。 國(guó)內(nèi)非滅活型病毒保存液哪家好還可以用于各種病毒樣品、衣原體樣品包括近肆虐全球的原樣品的取樣。
病毒保存液(滅活型)采用高濃度的胍鹽可以快速對(duì)呼吸道病原體進(jìn)行滅活、保存,,使樣品失去性,里面含有的Tris、裂解鹽、EDTA等主要目的是裂解核酸而釋放出核酸,從而通過(guò)后續(xù)的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR進(jìn)行核酸檢測(cè),以此判斷樣本是否含有病毒特征核酸,即是否病毒。操作簡(jiǎn)單無(wú)需配液,體系內(nèi)含有高效病毒裂解液,采樣后即刻滅活病毒,有效防止二次風(fēng)險(xiǎn)。 產(chǎn)品采樣前可常溫保存12個(gè)月,采樣后樣本可常溫保存一周,密閉性好,方便保存運(yùn)輸,節(jié)省運(yùn)輸成本。內(nèi)含核酸Rnase酶抑制劑,更大化程度保護(hù)病毒核酸穩(wěn)定不被降解,大幅提高核酸提取效率。
滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液體含有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測(cè)樣本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同時(shí)又含有Rnase酶抑制劑,能保護(hù)病毒核酸不被降解,后續(xù)的NT-PCR實(shí)驗(yàn)只要能檢測(cè)出病毒的核酸既可以做出診斷。而且能夠在常溫下保存相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間。
病毒的檢測(cè)不同于常規(guī)的生化檢測(cè),病毒本身是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的微生物,必須 寄生在活細(xì)胞內(nèi)。采樣后,病毒離開寄主細(xì)胞,在采樣管內(nèi)其蛋白質(zhì)外殼和核酸都會(huì)很快降解,這樣核酸檢測(cè)時(shí)就無(wú)法判斷初始采集的樣本是否含有病毒,容易造成假陰性。 可以用來(lái)采集咽拭子鼻拭子或者特定部位的組織樣本儲(chǔ)存的樣本可以用于后續(xù)的核酸檢測(cè)或者病毒培養(yǎng)臨床實(shí)驗(yàn)。
病毒采樣管-適用于、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒標(biāo)本以及支原體、脲原體、衣原體標(biāo)本的采集及運(yùn)送。病毒及相關(guān)樣本的冷藏狀態(tài)下(2-8℃)的48小時(shí)內(nèi)保存與運(yùn)輸。病毒及相關(guān)樣本的-80℃環(huán)境或液氮環(huán)境中的長(zhǎng)時(shí)間保存。
病毒采樣管搜集病毒的采樣方法
1、先用壓舌板壓住舌頭,然后將采樣拭子頭部伸入咽喉部位擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,輕度用力拭抹咽后壁部位,應(yīng)避免觸及舌部。
2、以拭子測(cè)量鼻尖到耳垂的距離并用手指做標(biāo)記,將采樣拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子伸入距離少應(yīng)達(dá)耳垂部位到鼻尖長(zhǎng)度的一半,使拭子在鼻內(nèi)停留15-30秒,輕輕旋轉(zhuǎn)3-5次,抽出拭子。
非滅活型的主要優(yōu)點(diǎn)是檢出率高,缺點(diǎn)是具有一定的危險(xiǎn)性。四川滅活病毒保存液廠家批發(fā)價(jià)
可在較寬的溫度范圍內(nèi)維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽(yáng)性率?;葜莶《颈4婀懿《颈4嬉菏裁磧r(jià)格
采樣前,在標(biāo)簽上注明樣品信息;
根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,用采樣拭子在相?yīng)的部位采樣;
采樣后迅速將拭子放入含病毒運(yùn)送培養(yǎng)基采樣管中,在折斷點(diǎn)處將其折斷,旋緊管蓋;
使用滅活款采樣管新鮮采集的標(biāo)本,可在常溫(5-25°C)條件下,7天內(nèi)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,運(yùn)輸時(shí)有冰袋的效果會(huì)更好。用于核酸檢測(cè)的標(biāo)本,24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)效果更好。
具體采樣方法如下:
(1)鼻拭子:將拭子頭輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以另一拭子拭另側(cè)鼻孔,將拭子頭浸入采樣液中,在折斷點(diǎn)處將其折斷,棄之。(適合用本產(chǎn)品采樣)
(2)咽拭子:用拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,同樣將拭子頭浸入采樣液中,棄之。(適合用本產(chǎn)品采樣)。 惠州病毒保存管病毒保存液什么價(jià)格
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