胎牛血清對細(xì)胞貼壁中的作用:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),大部分來自實(shí)體組織感官的細(xì)胞會貼壁。它們在機(jī)體內(nèi)時(shí),也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的,貼壁對維持細(xì)胞的良好形態(tài)和促進(jìn)細(xì)胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細(xì)胞,其增殖率也較高。人的造血干細(xì)胞培養(yǎng),更是需要有貼壁細(xì)胞構(gòu)成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,上皮樣細(xì)胞,脂肪細(xì)胞,它們交錯(cuò)連接,構(gòu)成網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)基中加入牛血清,對于粘附細(xì)胞的貼壁也很有幫助。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對細(xì)胞粘附都有促進(jìn)作用。需注意,熱滅活小牛血清會降低血清對細(xì)胞粘附的促進(jìn)作用,尤其在細(xì)胞旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)時(shí)更為明顯。胎牛血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲就是血清中大量的蛋白在快速融化。珠海特級血清哪里有
胎牛血清制備:離心,將準(zhǔn)備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后,對稱放入離心機(jī),按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機(jī)抽氣口上。打開壓縮機(jī),用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內(nèi)的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。黃石標(biāo)準(zhǔn)血清哪家好胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng),是細(xì)胞生長天然的培養(yǎng)基。
胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。所有胎牛血清均在當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協(xié)會要求。胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng),是細(xì)胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細(xì)胞提供生長因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來促進(jìn)體外細(xì)胞培養(yǎng)。
胎牛血清:解凍胎牛血清時(shí),請按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。胎牛血清提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等。
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應(yīng)該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。如果想要去除這些絮狀沉淀物,可以采取離心法,400g,離心1~2分鐘,將上清重新分裝即可使用。胎牛血清中含有豐富的促進(jìn)細(xì)胞生長的成分,如維生素、運(yùn)輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要。合肥去外泌體血清價(jià)格
我們常會看到胎牛血清的標(biāo)注上有對產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的。珠海特級血清哪里有
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時(shí)的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。珠海特級血清哪里有
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