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來源: 發(fā)布時間:2023-08-26

胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。紹興特級胎牛血清哪里有

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胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。所有胎牛血清均在當?shù)孬F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協(xié)會要求。胎牛血清參與細胞培養(yǎng),是細胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養(yǎng)。紹興特級胎牛血清哪里有胎牛血清非常適合各種細胞的培養(yǎng)。

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用于體外細胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆?;將血漿分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中,向其中加入300-700mL去離子水,攪拌均勻,使用質量分數(shù)為10-20%的鹽酸溶液調節(jié)pH為7.0-7.3,將上述所收集的血漿倒入容器中,攪拌均勻,溫度設定為25-38℃,靜置8-20min,得混合液C;22)將上述的混合液C放入離心機中離心分離8-20min,轉速設定為3000-10000r/min,取上清液。

胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗陰性。5、支原體檢驗陰性。6、細菌內的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間≤15h克隆率≥85%。胎牛血清FBS一般需要冷凍保存。

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胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡稱FBS):胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺采的血后,通過一系列工藝處理獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失。新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡稱NBCS):出生14小時內未進食的新生牛,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。小牛血清(CalfSerum):出生后3天至6月齡小牛動脈采的血分離血清。成年牛血清(AdultBovineSerum,簡稱ABS)指的是屠宰時收集全血后分離得到血清。胎牛血清基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。南京進口胎牛血清報價

細胞培養(yǎng)胎牛血清是不可或缺重要培養(yǎng)基。紹興特級胎牛血清哪里有

胎牛血清在細胞培養(yǎng)中的作用:1.提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結合或調節(jié)它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。7.參與細胞凍存。在細胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養(yǎng)基的成分來確定較佳濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質。紹興特級胎牛血清哪里有

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