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胎牛血清-血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清在存儲(chǔ)的時(shí)候要在零下濕度的溫度下進(jìn)行保存,并且需要避免陽(yáng)光的照射,需要用恒溫冰箱來(lái)進(jìn)行保存。熱滅活反而影響胎牛血清中的活性成分。臺(tái)州賽業(yè)血清報(bào)價(jià)
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。2、pH,國(guó)產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。3、微生物。包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難徹底清理,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。泰州標(biāo)準(zhǔn)級(jí)血清價(jià)格胎牛血清保存需要避免陽(yáng)光的照射,需要用恒溫冰箱來(lái)進(jìn)行保存。
胎牛血清的處理方法有:熱滅活,F(xiàn)BS的常見(jiàn)處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補(bǔ)體系統(tǒng)的任何成分,以及其他潛在的未知細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染,這不再是一個(gè)問(wèn)題,因?yàn)楝F(xiàn)在所有的血清產(chǎn)品都通過(guò)小到足以去除支原體的孔徑進(jìn)行過(guò)濾。必須注意的是,熱滅活也可能產(chǎn)生不良影響,例如降低培養(yǎng)細(xì)胞附著在表面上的能力。熱滅活過(guò)程必須小心進(jìn)行,因?yàn)闇囟冗^(guò)高或長(zhǎng)時(shí)間加熱會(huì)使生長(zhǎng)因子失活,并產(chǎn)生沉淀物。
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:透析胎牛血清,顧名思義,需經(jīng)過(guò)透析。它是在4°C下用特定的透析膜對(duì)血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過(guò),在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化學(xué)小分子、核苷酸、某些鹽、低分子量蛋白質(zhì)、氨基酸、細(xì)胞因子、葡萄糖、殘留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何時(shí)呢?由于不可能監(jiān)測(cè)全部小分子,因此常選用葡萄糖為體現(xiàn)。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析過(guò)程中,除監(jiān)測(cè)葡萄糖濃度外(可采用葡萄糖氧化酶方法測(cè)定),還需仔細(xì)監(jiān)測(cè)pH值和滲透壓。胎牛血清不推薦做熱滅活,因?yàn)樘ヅ_€未有發(fā)育完全的補(bǔ)體系統(tǒng)。
選購(gòu)FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)?產(chǎn)品檢測(cè),每款FBS在生產(chǎn)上市之前,必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè)。質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產(chǎn)品分析證書(shū)(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)包括內(nèi)的毒性、總蛋白、細(xì)菌、病毒等,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測(cè)不高于30mg/dL。質(zhì)量驗(yàn)證我們使用FBS目的是為了讓細(xì)胞更真實(shí)、健康地生長(zhǎng)。在確保了FBS的來(lái)源真實(shí)性、安全可靠性后,下一步就要對(duì)FBS的質(zhì)量,即培養(yǎng)細(xì)胞的效果進(jìn)行鑒定了,而這也是決定細(xì)胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè)。臺(tái)州賽業(yè)血清報(bào)價(jià)
胎牛血清應(yīng)用比較普遍。臺(tái)州賽業(yè)血清報(bào)價(jià)
活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)。同時(shí)活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長(zhǎng)因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無(wú)菌過(guò)濾內(nèi)的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較少。臺(tái)州賽業(yè)血清報(bào)價(jià)
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