胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養(yǎng)已經超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發(fā)現(xiàn),由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產的一切環(huán)節(jié)均有嚴格的質量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內的毒性含量低,滿足絕大多數(shù)細胞培養(yǎng)需求。胎牛血清FBS一般需要冷凍保存。鹽城標準血清
胎牛血清都有哪些重要的指標:一、內的毒性,內的毒性是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有成分。當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,才表現(xiàn)其毒性。內的毒性直接參與細胞凋亡,血清中內的毒性含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內的毒性含量過高,會直接導致細胞提前老化。國際上規(guī)定,胎牛血清的級別,應以內的毒性水平的高低來確定,其中,特級胎牛血清的內的毒性應<10EU/ml。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細胞培養(yǎng)用血清的標準是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采的血過程的嚴謹規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。莆田不含外泌體胎牛血清哪里有賣胎牛血清的蛋白質含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。
胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質Hormone傾向于干擾免疫測定系統(tǒng)和胰島素測定方法。2.透析,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。這包括極性和非極性分子。去除細胞因子、葡萄糖、氨基酸和許多其他物質。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術指標,1、內的毒性,標準為不高于5EU/ml。內的毒性是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍??梢?,內的毒性含量偏高不影響質量,除非含量極高,預示著已經污染。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質會比水先融化。冰塊底部亮亮的細絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌?,細胞復蘇時,要保持細胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設2-8℃,所以各實驗室融化時間會稍有出入)。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。莆田不含外泌體胎牛血清哪里有賣
胎牛血清是通過母牛剖腹產胎牛心臟密閉穿刺采的血獲得的新鮮胎牛全血。鹽城標準血清
胎牛血清的功能:胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。鹽城標準血清
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