在體光纖成像記錄的應(yīng)用,揭示機(jī)體的生理病理改變過(guò)程,目前, 在體生物光學(xué)成像技術(shù)己成功應(yīng)用于 干細(xì)胞移植、 壞掉的免疫、 毒血癥、 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 皮炎等發(fā)病機(jī)制的研究中, 可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物機(jī)體的生理、病理改變過(guò)程, 具有重要的臨床意義。藥物的篩選和評(píng)價(jià)的應(yīng)用目前 , 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型己大量應(yīng)用于病理研究、藥物研發(fā)、 藥物篩選和藥物評(píng)價(jià)等領(lǐng)域。通過(guò)體外基因轉(zhuǎn)染或直接注射等手段, 將熒光素酶或綠色熒光蛋 自等報(bào)告基因標(biāo)記在生物體內(nèi)的任何細(xì)胞, 如:壞掉的細(xì)胞、 造血細(xì)胞等上, 采用在體生物光學(xué)成像技術(shù)對(duì)其示蹤, 了解細(xì)胞在生物體內(nèi)的轉(zhuǎn)移規(guī)律,不單能夠檢測(cè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物體 內(nèi)的基因表達(dá)或 內(nèi)源性基因的活性和功能, 而且能夠?qū)λ幬锖Y選及療效進(jìn)行評(píng)價(jià)。在體光纖成像記錄都需要光學(xué)技術(shù)配合生物樣本的特性發(fā)展。鎮(zhèn)江在體實(shí)時(shí)影像光纖服務(wù)
在體光纖成像記錄的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用:低能量、無(wú)輻射、對(duì)信號(hào)檢測(cè)靈敏度高、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)標(biāo)記的生物體內(nèi)細(xì)胞活動(dòng)和基因行為被較多應(yīng)用于監(jiān)控轉(zhuǎn)基因的表達(dá)、基因療于、染上的進(jìn)展、壞掉的的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、系統(tǒng)移植、毒理學(xué)、病毒染上和藥學(xué)研究中。可見(jiàn)光成像的主要缺點(diǎn):二維平面成像、不能對(duì)的定量。具有標(biāo)記的較多性,有關(guān)生命活動(dòng)的小分子、小分子藥物、基因、配體、抗體等都可以被標(biāo)記;對(duì)于淺部組織和深部組織都具有很高的靈敏度可獲得斷層及三維信息,實(shí)現(xiàn)較精確的定位。常州在體神經(jīng)元活動(dòng)記錄技術(shù)在體光纖成像記錄生物醫(yī)學(xué)很多融合因素。
在體光纖成像記錄的目的是實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的活性變化?;阝}離子濃度變化的熒光成像技術(shù)被較多用來(lái)記錄神經(jīng)元活性。在體光纖記錄方法與傳統(tǒng)的在體電生理記錄方法有著不同的特點(diǎn),光纖記錄因其穩(wěn)定、方便、易上手而應(yīng)用較多。首先,將熒光蛋白表達(dá)在特定類(lèi)型的神經(jīng)元中,光纖記錄可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類(lèi)型特異性的活性檢測(cè),而用電生理記錄的方法記錄特定類(lèi)型的神經(jīng)元的活性比較困難。其次,電生理記錄容易受到環(huán)境中的電信號(hào)以及動(dòng)物的行為動(dòng)作影響,而光纖記錄相對(duì)來(lái)說(shuō)有著較強(qiáng)的抗干擾性能。然后,光纖記錄相對(duì)穩(wěn)定,可以很容易實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)程的活性檢測(cè),例如動(dòng)物的整個(gè)學(xué)習(xí)過(guò)程,而利用電生理記錄實(shí)現(xiàn)起來(lái)則相對(duì)困難。較后,光纖記錄用神經(jīng)元群體的熒光強(qiáng)度變化來(lái)表征神經(jīng)元整體的活性變化,不能反映單個(gè)神經(jīng)元的活性,而電生理記錄則能夠檢測(cè)到單個(gè)神經(jīng)元的活性,具有更高的空間分辨率。
在體監(jiān)測(cè)基因療于中的基因表達(dá),隨著 后基因組時(shí)代的到來(lái)和人們對(duì)疾病發(fā)生的發(fā)展機(jī)制的深入了解, 在基因水平上療于壞掉的、 心血管疾病、 和分子遺傳病等惡性疾病已經(jīng)得到國(guó)內(nèi)外研究人員越來(lái)越 較多的關(guān)注。如何客觀地檢測(cè)基因療于的臨床療效判斷終點(diǎn), 有效監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)基因在生物體內(nèi)的傳送, 并定量檢測(cè)基因療于的轉(zhuǎn)基因表達(dá), 己經(jīng)成為 基因療于應(yīng)用的關(guān)鍵所在 。通過(guò)熒光素酶或綠色熒光蛋白等報(bào)告基因, 在體光纖成像記錄能夠進(jìn)行基因表達(dá)的準(zhǔn)確定位和定量分析, 在整體水平上無(wú)創(chuàng)、 實(shí)時(shí)、 定量地檢測(cè)轉(zhuǎn)基因的時(shí)空表達(dá)。在體光纖成像記錄通過(guò)一次成像就可獲取整個(gè)圖像。
小動(dòng)物在體光纖成像記錄可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要通過(guò)尾靜脈注射、皮下移植、原位移植等方法接種已標(biāo)記的細(xì)胞或組織。在建模時(shí)應(yīng)認(rèn)真考慮實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮瓦x擇熒光標(biāo)記,如標(biāo)記熒光波長(zhǎng)短,則穿透效率不高,建模時(shí)不宜接種深部臟器和觀察體內(nèi)轉(zhuǎn)移,但可以觀察皮下瘤和解剖后臟器直接成像。深部臟器和體內(nèi)轉(zhuǎn)移的觀察大多選用熒光素酶標(biāo)記。小鼠經(jīng)過(guò)常規(guī)麻醉(氣麻、針麻皆可)后放入成像暗箱平臺(tái),軟件控制平臺(tái)的升降到一個(gè)合適的視野,自動(dòng)開(kāi)啟照明燈(明場(chǎng))拍攝首先一次背景圖。下一步,自動(dòng)關(guān)閉照明燈,在沒(méi)有外界光源的條件下(暗場(chǎng))拍攝由小鼠體內(nèi)發(fā)出的特異光子。明場(chǎng)與暗場(chǎng)的背景圖疊加后可以直觀的顯示動(dòng)物體內(nèi)特異光子的部位和強(qiáng)度,完成成像操作。值得注意的是熒光成像應(yīng)選擇合適的激發(fā)和發(fā)射濾片,生物發(fā)光則需要成像前體內(nèi)注射底物激發(fā)發(fā)光。在體光纖成像記錄另一端的中心點(diǎn)位于同一直線上。常州在體神經(jīng)元活動(dòng)記錄技術(shù)
在體光纖成像記錄要求共聚焦系統(tǒng)具有較高的靈敏度。鎮(zhèn)江在體實(shí)時(shí)影像光纖服務(wù)
在體光纖成像記錄的工作原理是將光源入射的光束經(jīng)由光纖送入調(diào)制器,在調(diào)制器內(nèi)與外界被測(cè)參數(shù)的相互作用, 使光的光學(xué)性質(zhì)如光的強(qiáng)度、波長(zhǎng)、頻率、相位、偏振態(tài)等發(fā)生變化,成為被調(diào)制的光信號(hào),再經(jīng)過(guò)光纖送入光電器件、經(jīng)解調(diào)器后獲得被測(cè)參數(shù)。整個(gè)過(guò)程中,光束經(jīng)由光纖導(dǎo)入,通過(guò)調(diào)制器后再射出,其中光纖的作用首先是傳輸光束,其次是起到光調(diào)制器的作用。波長(zhǎng)為2.0~1000微米的部分稱為熱紅外線。我們周?chē)奈矬w只有當(dāng)它們的溫度高達(dá)1000℃以上時(shí),才能夠發(fā)出可見(jiàn)光。相比之下,我們周?chē)袦囟仍趯?duì)的零度(-273℃)以上的物體,都會(huì)不停地發(fā)出熱紅外線。所以,熱紅外線(或稱熱輻射)是自然界中存在較為較多的輻射。鎮(zhèn)江在體實(shí)時(shí)影像光纖服務(wù)
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