對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。主要是:血清的成份可能有幾百種之多,對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難;血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。胎牛血清中的物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。溫州特級血清品牌
非正規(guī)胎牛血清的產(chǎn)品會存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質(zhì)檢使胎牛血清存在生物學(xué)污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結(jié)果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導(dǎo)致采集的原血放置時間過長或操作不當(dāng)導(dǎo)致溶血,血液中血細(xì)胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,里面很多物質(zhì)都會對細(xì)胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補(bǔ)?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進(jìn)行加工生產(chǎn),為了保障血清的培養(yǎng)效果會對血清進(jìn)行處理,較為常見的是添加、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學(xué)實驗都有巨大的影響。溫州特級血清品牌瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點,除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細(xì)胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細(xì)心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。
血清的主要作用:對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝醫(yī)治中起重要作用,如SeO3,硒等。胎牛血清的其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚。
胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么?取血年齡不同:牛血清按照牛取血時間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。國產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常以此稱)的指的是出生4-6小時,且未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的牛,有時還稱作國產(chǎn)新生牛。 新生牛血清指的是出生14天-3個月進(jìn)行取血的牛。成年牛血清指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因為牛血多為畜牧業(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。組分與比例不同:這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因為胎牛未進(jìn)食過母乳,所以IgG含量低。用途與用法不同:根據(jù)細(xì)胞所需生長條件可確定。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。溫州特級血清品牌
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛。溫州特級血清品牌
血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。溫州特級血清品牌