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細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀(guān)察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀(guān)察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀(guān)察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘?。谎遒|(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。胎牛血清支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長(zhǎng)曲線(xiàn)(接種濃度)大增殖濃度≥2.5×106 個(gè)/ml。舟山OriCell胎牛血清供應(yīng)商
胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過(guò)百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國(guó)外起步較早,認(rèn)識(shí)也較深入。應(yīng)該說(shuō),胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢(shì)。因?yàn)槠錉I(yíng)養(yǎng),所以幾乎適合所有類(lèi)型的細(xì)胞生長(zhǎng),每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細(xì)胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動(dòng),有時(shí)甚至波動(dòng)較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時(shí),要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過(guò)2000升。因此,在更換批次時(shí),要注意觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)和狀態(tài)。合肥進(jìn)口血清哪里有賣(mài)血清對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶。
細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻!胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
很好的胎牛血清對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)的作用:提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然或天然的生長(zhǎng)因子。提供天然的結(jié)合蛋白,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對(duì)細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn),因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。提供醫(yī)治功能。這主要通過(guò)血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來(lái)完成的。如金屬硫蛋白,對(duì)多種重金屬有高度親和性,并可消除細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境中的氧自由基,具有很強(qiáng)的抗氧化活性,可防止細(xì)胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。因此在細(xì)胞消化時(shí),常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。胎牛血清的細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)為細(xì)胞生長(zhǎng)提供必要的營(yíng)養(yǎng)成分,對(duì)于研究細(xì)胞的科學(xué)人士來(lái)說(shuō),血清都不會(huì)陌生,其中胎牛血清是實(shí)驗(yàn)操作的??汀R话愣?,胎牛血清是指懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟穿刺后,通過(guò)一系列工藝處理獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子自動(dòng)消失。胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來(lái)加熱已經(jīng)完全解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過(guò)程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過(guò)胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求,客戶(hù)可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。血清的主要作用是提供促接觸和生長(zhǎng)因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。合肥進(jìn)口血清哪里有賣(mài)
胎牛血清常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。舟山OriCell胎牛血清供應(yīng)商
不同產(chǎn)地的胎牛血清,品質(zhì)也是相差甚遠(yuǎn)。值得注意的是,胎牛血清是動(dòng)物源生物制品,我國(guó)對(duì)于動(dòng)物源制品的進(jìn)口一直有很?chē)?yán)格的規(guī)定,目前我國(guó)批準(zhǔn)進(jìn)口的胎牛血清來(lái)源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭,合法正規(guī)途徑進(jìn)口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標(biāo)注血源地。這意味著,其他血源地的胎牛血清在我國(guó)是不允許進(jìn)口的,在選購(gòu)進(jìn)口產(chǎn)品時(shí),要規(guī)避選取來(lái)源為禁止輸入國(guó)家的相關(guān)產(chǎn)品。合法進(jìn)口的胎牛血清需符合我國(guó)海關(guān)和檢驗(yàn)檢疫部門(mén)的監(jiān)管要求,具備真實(shí)完整的進(jìn)口貨物報(bào)關(guān)單和出入境檢驗(yàn)檢疫入境貨物檢驗(yàn)檢疫證明。選購(gòu)胎牛血清時(shí),需要核對(duì)廠(chǎng)家是否能提供購(gòu)買(mǎi)批次的進(jìn)口報(bào)關(guān)單和檢驗(yàn)檢疫證書(shū),烏拉圭來(lái)源的血清還必須具有出口許可證,確保產(chǎn)品來(lái)源安全可追溯。舟山OriCell胎牛血清供應(yīng)商