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超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過(guò)超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來(lái),而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過(guò)膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子,一般來(lái)說(shuō)超濾的回收率能夠達(dá)到90%以上,因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過(guò)濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對(duì)被處理的分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性,且簡(jiǎn)單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個(gè)內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過(guò)濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點(diǎn),可應(yīng)用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD六種不同的截留分子量中。截留分子量標(biāo)識(shí)和體積刻度蝕刻在濃縮器的側(cè)面便于識(shí)別。超濾離心管可用于制備純度高的蛋白質(zhì),以進(jìn)行晶體結(jié)構(gòu)解析或其他實(shí)驗(yàn)室操作。浙江10K超濾離心管排行榜
離心管,管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋,是實(shí)驗(yàn)室里面常見(jiàn)的一種實(shí)驗(yàn)耗材,主要是配合離心機(jī)使用,即將實(shí)驗(yàn)液體裝在其中,然后放在離心機(jī)里面離心。進(jìn)口離心管按照材料分類:塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會(huì)選擇不同的塑料材料來(lái)進(jìn)行制作。根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時(shí),就要考慮進(jìn)口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度,插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。浙江10K超濾離心管排行榜使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意保持樣品干燥、無(wú)污染和清潔。
質(zhì)量和重心都應(yīng)該平衡。注意速度和加速度不要太快,否則會(huì)直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心預(yù)冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說(shuō)明進(jìn)行調(diào)整(對(duì)于角向離心機(jī),膜垂直于軸〉。在實(shí)際應(yīng)用中,一般的速度開度比手動(dòng)低,可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。4。當(dāng)濃縮到剩余的1毫升時(shí),取中國(guó)產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流過(guò),看是否變藍(lán),以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上層,然后流過(guò)新管道開始超濾。為了準(zhǔn)確確定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA離心10分鐘,然后將其穿過(guò),大致運(yùn)行膠水或Bradf ord,繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮(在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉,直到所有濃縮物都添加完畢。離心過(guò)程中應(yīng)注意是否有蛋白質(zhì)沉淀,導(dǎo)致堵塞。如果發(fā)生沉淀,有必要確定沉淀的具體原因是蛋白質(zhì)濃度過(guò)高還是緩沖液不當(dāng)。
超濾離心管采用再生纖維素膜,具有較高的回收率(>90%)和 高濃縮倍數(shù)(80–100 倍),100%完整性檢測(cè)確保性能可靠,主要應(yīng)用與生物樣品與蛋白濃縮、大分子組分的純化、脫鹽和緩沖液更換。再生纖維素膜具有一系列截留分子量,用戶可根據(jù)目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積,選用不同體積大小和MWCO的超濾管。超濾離心管備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。超濾離心管應(yīng)用范圍:*生物樣品濃縮:包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物。*對(duì)組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化。*對(duì)稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮。*脫鹽和緩沖液更換。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作程序和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范,并定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)和保養(yǎng)。
注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤(rùn)濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。6.使用方法:1).將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。2).向超濾管內(nèi)管中加入不超過(guò)500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3).將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管平衡。4).以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時(shí)間取決于所使用超濾管的NMWL。5).離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。6).為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過(guò)來(lái)插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡。以1 ,000 x g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。超濾離心管通常需要冷藏保存,以保持其性能和壽命。浙江10K超濾離心管排行榜
超濾離心管可以用于制備血液制品、免疫球蛋白等緩解藥物,以緩解某些自身免疫性疾病。浙江10K超濾離心管排行榜
玻璃離心管:使用玻璃管時(shí)離心力不宜過(guò)大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對(duì)高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時(shí),液體一定要加滿離心管,因?yàn)槌x需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。塑料離心管:塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出樣本。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來(lái)說(shuō)比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買離心管。浙江10K超濾離心管排行榜