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蛋白質(zhì)濃縮和替代緩沖液常用的超濾管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超濾管。根據(jù)靶蛋白的分子量、濃縮前的體積和濃縮的靶體積,還可提供不同尺寸和尺寸的其他類型的mwco超濾管。它可以重復(fù)使用。1。選擇合適的超濾管主要考慮分子量和濃度。通常靶蛋白的分子量不應(yīng)大于靶蛋白分子量的1/3。例如,當(dāng)靶蛋白的分子量為35kDa時(shí),可以選擇靶蛋白分子量為10kDa的超濾管。如果靶蛋白的分子量約為10kd,則可使用分子量為3kd的超濾管。2。新購(gòu)買的超濾是干燥的。使用前加入Milliq水。水的體積完全覆蓋在膜上,冰浴或冰箱被預(yù)先冷卻幾分鐘。倒出水后,可以加入蛋白質(zhì)溶液。蛋白質(zhì)添加量不超過(guò)管頂白線。超濾管在加入蛋白質(zhì)溶液前需要在冰上預(yù)先冷卻。三。平衡。超濾離心管通常具有不同材質(zhì)的選擇,以適應(yīng)不同化學(xué)環(huán)境下的使用需求。金華100K超濾離心管生產(chǎn)廠
以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤(rùn)洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來(lái)水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個(gè)小時(shí),再換新的水,放置幾個(gè)小時(shí),不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來(lái)水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水,然后蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來(lái)說(shuō),按照上述步驟和注意事項(xiàng),每根管用三四年不會(huì)壞。金華100K超濾離心管生產(chǎn)廠超濾離心管可以通過(guò)手動(dòng)或自動(dòng)方式進(jìn)行操作,以適應(yīng)不同的實(shí)驗(yàn)室流程要求。
超濾離心管是否可以重復(fù)使用:離心超濾管通常不能消毒再次性使用。由于單管價(jià)格并不便宜,不少人嘗試重復(fù)使用----經(jīng)驗(yàn)是用蒸餾水清洗膜表面多次,離心一次到兩次,那種可以反向離心的小管子可以加蒸餾水浸泡后反向多離心一次,會(huì)好些??芍貜?fù)用于同一樣品,不用時(shí)可用蒸餾水浸泡,但是要防止細(xì)菌污染。不同樣品就不要混用了。有人說(shuō)泡在20%酒精、1N的NaOH(氫氧化鈉)中,防止長(zhǎng)菌,而且防干,只要超濾膜侵了水,就不可以再讓它干,但也有人說(shuō)會(huì)破壞膜結(jié)構(gòu)。反正廠家一般不支持重復(fù)用。多次重復(fù)使用會(huì)堵塞濾膜上的孔徑,甚至出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過(guò)濾器和一個(gè)50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過(guò)程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請(qǐng)檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對(duì)預(yù)定用途的適用性,建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn)。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。超濾離心管還可用于藥代動(dòng)力學(xué)和藥物分析中,以確定藥物代謝和藥效學(xué)參數(shù)。
超濾離心管的原理:根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時(shí)間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計(jì)也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;Chemicalbook死體積設(shè)計(jì)能有效防止過(guò)度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實(shí)現(xiàn)高效回收。超濾離心管的應(yīng)用:1)濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3)除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、酶溶液等。金華100K超濾離心管生產(chǎn)廠
超濾離心管可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。金華100K超濾離心管生產(chǎn)廠
其實(shí),離心管是離心機(jī)中較重要的配件之一,它主要是用來(lái)承裝實(shí)驗(yàn)樣品的,我們使用離心機(jī)時(shí),首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說(shuō)離心管是離心機(jī)較重要的配件之一是因?yàn)?,如果沒有離心管,樣品就沒辦法承裝。那么,了解過(guò)離心管的作用之后,你知道離心管應(yīng)該如何選擇嗎?相信連用過(guò)離心機(jī)的朋友都不會(huì)很清楚。那么接下來(lái)小編帶你了解一下離心管應(yīng)該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說(shuō)到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。金華100K超濾離心管生產(chǎn)廠