PVDF膜作為基質(zhì)的轉(zhuǎn)印膜由M公司在1985年首先推出。與傳統(tǒng)的硝酸纖維素膜相比,PVDF膜在蛋白質(zhì)截留能力,機械強度和化學(xué)相容性上都更優(yōu)越的性能。不只如此,PVDF膜還是蛋白測序時的選擇。因為PVDF膜具有良好的化學(xué)耐受性,能適應(yīng)“嚴酷”的清洗條件,同等條件下的尼龍或者硝酸纖維素膜都會發(fā)生降解。據(jù)了解,國際總水量中只有大約0.01%可供人類運用,水資源危機不斷加重。并且隨著氣候變化、人口增長和全球城市化進程的加速,水的可用性在不斷下降。廢水處理技術(shù)作為環(huán)保領(lǐng)域的重要課題,擁有廣闊的發(fā)展空間。在水處理過程中,PVDF膜常被用于污水、海水淡化等的前處理,去除大分子、細菌、泥沙等雜質(zhì)。PVDF轉(zhuǎn)印膜具有上佳的柔韌性和延展性。嘉興透明反光轉(zhuǎn)印膜廠
隨著膜孔徑減小,膜的實際可用表面積遞增,膜結(jié)合蛋白的量也遞增. 估量表面積的參數(shù)為表面積比率(實際可用表面積與所用膜平面積的比率).另外, 膜孔徑越小,層析速度也越小,那么金標復(fù)合物通過T線的時間也就越長,反應(yīng)也就越充分.綜合以上兩點,結(jié)論為膜孔徑越小靈敏度越高.但是同時也減慢了跑板速度,增加了非特異性結(jié)合的機會,也就是假陽性越高.所以要按照試驗結(jié)果挑選適合實際項目的膜,找到合適的平衡點。首先,單克隆抗體與膜的結(jié)合優(yōu)于多克隆抗體, 主要時由于多克隆抗體有很多不同的表面位點, 而各位點與膜的較佳結(jié)合條件都有細微的差別, 毫無疑問就增加了優(yōu)化難度。其次,分子量越大,蛋白越難結(jié)合到固相材料上。重慶Western 印跡轉(zhuǎn)印膜廠家電話膜材料具有良好的平整度和表面硬度。
我公司提供完整的轉(zhuǎn)印解決方案,純硝酸纖維素膜和帶支撐的MCE膜,純PVDF和帶支撐的PVDF膜,帶支撐的中性尼龍膜和帶電尼龍膜。邁恩硝化纖維素轉(zhuǎn)印膜可用于所有蛋白質(zhì)印跡或免疫印跡應(yīng)用,其高靈敏度確保了轉(zhuǎn)印的優(yōu)異結(jié)果,特別是蛋白質(zhì)印跡。邁恩PVDF膜是天然疏水的,無支撐的轉(zhuǎn)印膜;它具有高結(jié)合力,可防止蛋白質(zhì)穿過膜,低背景值可提供出色的信噪比;它還具有優(yōu)異的拉伸強度,可防止其開裂、撕裂、斷裂或卷曲;該膜還具有普遍的化學(xué)相容性,當與常用燃料一起使用時(如酰胺黑、膠體金、考馬斯亮藍、印度墨水和麗春紅),當使用高濃度甲醇用于脫色時,PVDF不會降解、變形或收縮。其優(yōu)越的強度,高結(jié)合力和化學(xué)相容性使邁恩的PVDF轉(zhuǎn)印膜成為蛋白質(zhì)印跡、免疫印跡、固相分析和菌斑轉(zhuǎn)移的理想選擇。
首先,我們分析一下液體在膜上的運動過程. 一張長度為4cm的膜, 每隔1cm做一個標記, 當液體運動過標記處時記錄時間點. 那么你將會發(fā)現(xiàn)液體在膜上的運動是呈減速前行的. 而兩張不同秒數(shù)的膜(例如135s, 180s)在同一時間標記點處的運動速度不同.這個試驗用清水做不好觀察,可以考慮用色素水溶液,非常明顯。那么從這個試驗可以看出,在通過同一T線噴點位置時, 金溶液通過的速度是快速膜大于慢速膜. 那么通過速度越快和包被在T線的物質(zhì)反應(yīng)時間也就越短, 讀數(shù)快, 那么靈敏度也就越低. 反之, 反應(yīng)時間長, 讀數(shù)慢, 也就靈敏度高. 同時還有一個問題是, 反應(yīng)時間越長, 發(fā)生非特異性結(jié)合的可能性就越大, 所以過長時間的反應(yīng)不一定就能夠真正的提升靈敏度. 所以這里就有一個讀數(shù)時間/反應(yīng)靈敏度/非特異性結(jié)合的均衡。膜材料可以靈活搭配不同的顏色和紋理。
安裝轉(zhuǎn)印槽子:將濾紙和海綿放入電印跡緩沖液中浸泡一下,依次按照海綿、濾紙、PVDF膜、凝膠、濾紙、海綿的次序?qū)㈦娪≯E夾層裝好,并放入小型電轉(zhuǎn)槽中;電印跡轉(zhuǎn)移:于轉(zhuǎn)印條件下(50V,100-170mA)室溫進行電印跡轉(zhuǎn)移,轉(zhuǎn)移時間一般為5-2小時(根據(jù)蛋白質(zhì)具體分子量大小而定);PVDF膜染色前處理:取出PVDF膜并用去離子水漂洗,用甲醇浸泡數(shù)秒鐘,然后進行染色;膜染色:染色劑30-50秒(切勿超過1分鐘),50%甲醇脫色(勤換脫色液),之后用去離子水充分洗滌后晾干即可。轉(zhuǎn)印膜是一種經(jīng)濟型選擇,用于核酸和蛋白質(zhì)印跡實驗方案。這種硝化纖維素轉(zhuǎn)印膜,是Southern、colony/plaque以及蛋白質(zhì)實驗方案中較初使用的膜。NC HATF所含的混合纖維素酯基質(zhì),不含在細胞生長過程中會干擾細胞壁完整性的表面活性劑。這些膜用于colony lifts。NC HAHY所含的混合纖維素酯基質(zhì),所帶的表面活性劑能夠增強可濕性以及轉(zhuǎn)印過程中的處理能力。兩種膜對核酸和蛋白質(zhì)都具有高吸附容量。適用于常規(guī)轉(zhuǎn)印。PVDF轉(zhuǎn)印膜材料能夠有效提高產(chǎn)品加工和生產(chǎn)效率。重慶Western 印跡轉(zhuǎn)印膜廠家電話
膜材料能夠提高產(chǎn)品外觀的美觀性。嘉興透明反光轉(zhuǎn)印膜廠
硝酸纖維素膜(NC膜)在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。硝酸纖維素膜是蛋白印跡實驗的標準固相支持物,在低離子轉(zhuǎn)移緩沖液的環(huán)境下,硝酸纖維素膜會吸附蛋白質(zhì),但其作用機理目前仍不能確定,憑借這一特性,硝酸纖維素膜在生物學(xué)試驗中應(yīng)用普遍,是較重要的耗材之一。硝酸纖維素膜(簡稱NC膜)具有高蛋白結(jié)合能力和高機械強度、毛細管率與厚度一致、使用中不需要甲醇預(yù)濕等性能,是膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應(yīng)試驗中較重要的耗材。另外,硝酸纖維素膜對于診斷層析試紙條的性能表現(xiàn)非常重要,是形成免疫復(fù)合物的固相支撐介質(zhì),用戶直接在膜上判讀結(jié)果,病毒病情爆發(fā)后多用于病毒檢測試劑。嘉興透明反光轉(zhuǎn)印膜廠