超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管?1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個移液管,通過左右掃動的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。超濾離心管可以用于制備血液制品、免疫球蛋白等緩解藥物,以緩解某些自身免疫性疾病。河北超濾離心管制造廠
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復(fù)到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復(fù)進行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而準(zhǔn), 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。北京10K超濾離心管排行榜超濾離心管在藥物代謝動力學(xué)研究中也具有重要意義,以確定藥物代謝途徑和藥效學(xué)參數(shù)。
玻璃離心管:使用玻璃管時離心力不宜過大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對高速離心機且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時,液體一定要加滿離心管,因為超離需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。塑料離心管:塑料離心管的優(yōu)點是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出樣本。缺點是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。
超濾離心管使用注意事項:(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至較低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法一時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。使用超濾離心管時應(yīng)注意遵循正確的操作程序和實驗室規(guī)范,并定期進行設(shè)備維護和保養(yǎng)。
我們面對上面客戶反映的問題使用2次以上出現(xiàn)問題是很正常的,但是我們也不能保證客戶使用5次,8次,還是更多次就一定會出現(xiàn)穿孔不能用,我們必須再一次強調(diào)提醒做實驗的各位老師,這個超濾管必須嚴格按照說明書規(guī)定,一次性使用,不要重復(fù)使用,重復(fù)使用雖然有的人可以用幾次,但是過濾效果已經(jīng)嚴重影響了,效果肯定一次次的下降!你說這樣過濾的樣品做后續(xù)實驗,那你的后續(xù)實驗還可信嗎?所以廠家也一再強調(diào)較好不要重復(fù)使用!另外,有的客戶說自己的超濾管使用一次就碎了,這是什么原因呢?超濾管的質(zhì)量問題還是離心機轉(zhuǎn)速的問題呢?說到這里,我們也再一次提醒大家超濾管使用如果轉(zhuǎn)速太高,離心力肯定會更大!這樣不斷用力磨損,很容易一次就碎了,也可能使用幾次碎了!超濾離心管也可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。青島100K超濾離心管
超濾離心管可以用于分離并提取草藥材料中的有效成分,以進行藥理學(xué)和毒理學(xué)研究。河北超濾離心管制造廠
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標(biāo)示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。下面就對各種材質(zhì)分別介紹一下。根據(jù)其材質(zhì)的不同總體可以分為塑料和玻璃的,塑料的離心管用的較多,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進行制作。河北超濾離心管制造廠