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超濾離心管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng),對(duì)于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理,也可以嘗試換成Amicon Ultra0.5或2來進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q水預(yù)清洗。如果干擾仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q水再次清洗后甩干。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免污染和交叉?zhèn)鞑ィ?duì)設(shè)備進(jìn)行徹底清潔消毒。深圳外泌體超濾離心管廠家有哪些
超濾離心管(JetSpinTM -5、15)分別可處理體積5mL和15mL以內(nèi)的樣本,離心管包含一個(gè)內(nèi)置聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點(diǎn),可應(yīng)用在多種不同的截留分子量中,一般來說回收率能夠達(dá)到90%以上。超濾離心管是一種用于分離液體的工具,常用于生物學(xué)和化學(xué)研究中。它的使用方法如下:1.將樣品液體加入超濾離心管內(nèi)。2.將超濾離心管放入離心機(jī)中進(jìn)行離心。3.離心結(jié)束后,打開離心管,收集離心液。4.根據(jù)需要,可以在使用前或使用后對(duì)超濾離心管進(jìn)行清洗和消毒。注意:每個(gè)研究史都有丕回要求:縣體操作應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)所盂進(jìn)行調(diào)整。安徽30K超濾離心管咨詢超濾離心管適用于小到大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室操作,并可進(jìn)行批量處理以提高效率。
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對(duì)50到500L樣本進(jìn)行簡(jiǎn)便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對(duì)應(yīng)各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識(shí)別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。超濾離心管可以根據(jù)不同孔徑大小選擇超濾膜,以便過濾出所需大小范圍內(nèi)的目標(biāo)分子。
超濾離心管應(yīng)用:除鹽、滲濾或更換緩沖液;濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA 樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本;凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在 HPLC 之前去除蛋白質(zhì)。產(chǎn)品組成:超濾離心管包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過濾器和一個(gè)離心管。產(chǎn)品特點(diǎn):較高的樣品回收率 (> 90% 的樣品回收率 );垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時(shí)間(10-15分鐘);經(jīng)過嚴(yán)格的泄漏測(cè)試;無 DNase、RNase,無熱原、無內(nèi)元素。使用這個(gè)超濾管,廠家強(qiáng)調(diào)一定是一次性的,這個(gè)超濾管必須只能使用一次,不能重復(fù)使用!超濾離心管的優(yōu)點(diǎn)包括速度快、效率高、易于操作和清洗等。深圳外泌體超濾離心管廠家有哪些
超濾離心管可用于制備純度高的蛋白質(zhì),以進(jìn)行晶體結(jié)構(gòu)解析或其他實(shí)驗(yàn)室操作。深圳外泌體超濾離心管廠家有哪些
離心管就是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定??芍貜?fù)使用,使用一次就扔掉太浪費(fèi)。以下是個(gè)人總結(jié)的使用方法和注意事項(xiàng)。離心超濾管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因?yàn)?6的也可能會(huì)出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。深圳外泌體超濾離心管廠家有哪些