當(dāng)濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管可以用于制備血液制品、免疫球蛋白等緩解藥物,以緩解某些自身免疫性疾病。浙江10K超濾離心管規(guī)格
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。湖州再生纖維素離心管廠家超濾離心管是一種用于分離和純化生物大分子的工具。
在選擇過程中,應(yīng)首先執(zhí)行以下步驟:1考慮樣品和分子特性:比如改變pH 可能增加構(gòu)象改變的風(fēng)險,而降低溫度可能降低濃縮效率等。2、選擇正確的膜:眾所周知,超濾沒有太多的膜選項,但您應(yīng)對再生纖維素和聚醚砜(PES)材料進行測試,以確定哪種材料可為您的特定材料提供較低的非特異性結(jié)合和較優(yōu)的回收率。3、選擇合適的截留分子量,通常是靶標1/3大小的截留分子量較適合。但有時則需要更小的孔徑來滿足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品,可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。選擇合適的裝置:賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質(zhì)、病毒、過濾應(yīng)用等普遍的裝置選項;選擇合適的裝置可以有效改善結(jié)果。
以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水,然后蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免與酸、堿等化學(xué)物質(zhì)接觸,以免損壞其結(jié)構(gòu)和性能。
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對預(yù)定用途的適用性,建議進行初步的回收和截留試驗。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。超濾離心管通常被用于食品科學(xué)中,以確定食品成分和營養(yǎng)價值。浙江10K超濾離心管規(guī)格
超濾離心管是現(xiàn)代實驗室必不可少的設(shè)備之一,為科研工作者提供了便利和支持。浙江10K超濾離心管規(guī)格
我們面對上面客戶反映的問題使用2次以上出現(xiàn)問題是很正常的,但是我們也不能保證客戶使用5次,8次,還是更多次就一定會出現(xiàn)穿孔不能用,我們必須再一次強調(diào)提醒做實驗的各位老師,這個超濾管必須嚴格按照說明書規(guī)定,一次性使用,不要重復(fù)使用,重復(fù)使用雖然有的人可以用幾次,但是過濾效果已經(jīng)嚴重影響了,效果肯定一次次的下降!你說這樣過濾的樣品做后續(xù)實驗,那你的后續(xù)實驗還可信嗎?所以廠家也一再強調(diào)較好不要重復(fù)使用!另外,有的客戶說自己的超濾管使用一次就碎了,這是什么原因呢?超濾管的質(zhì)量問題還是離心機轉(zhuǎn)速的問題呢?說到這里,我們也再一次提醒大家超濾管使用如果轉(zhuǎn)速太高,離心力肯定會更大!這樣不斷用力磨損,很容易一次就碎了,也可能使用幾次碎了!浙江10K超濾離心管規(guī)格
杭州邁恩科技有限公司是一家有著先進的發(fā)展理念,先進的管理經(jīng)驗,在發(fā)展過程中不斷完善自己,要求自己,不斷創(chuàng)新,時刻準備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司,在浙江省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中匯聚了大量的人脈以及**,在業(yè)界也收獲了很多良好的評價,這些都源自于自身的努力和大家共同進步的結(jié)果,這些評價對我們而言是比較好的前進動力,也促使我們在以后的道路上保持奮發(fā)圖強、一往無前的進取創(chuàng)新精神,努力把公司發(fā)展戰(zhàn)略推向一個新高度,在全體員工共同努力之下,全力拼搏將共同杭州邁恩科技供應(yīng)和您一起攜手走向更好的未來,創(chuàng)造更有價值的產(chǎn)品,我們將以更好的狀態(tài),更認真的態(tài)度,更飽滿的精力去創(chuàng)造,去拼搏,去努力,讓我們一起更好更快的成長!