上海IdeS蛋白酶抗體酶切

與IdeS不同，Genovis的FabULOUS（SpeB）是一種半胱氨酸蛋白酶，可在來自多個不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區(qū)域消化，產(chǎn)生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化，產(chǎn)生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是......KTHT...例如，制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結(jié)構(gòu)研究。對來自多個物種和亞類的IgG有活性–上鉸鏈區(qū)域的消化物；快速-在一小時內(nèi)生成Fab和Fc片段；有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來源于化膿性鏈球菌，在大腸桿菌中表達(dá)。FabULOUS的分子量為29kDa，該酶含有His標(biāo)簽。這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱，用于亞基的親和純化。上海IdeS蛋白酶抗體酶切

IgA 消化酶的 IgASAP 家族特異性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段。IgASAP Sub1 特異性消化人 IgA1，而 IgASAP Sub1+2 同時消化人 IgA1 和 IgA2m1。 Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。為了獲得純和完整的Fab片段，使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit進(jìn)行人IgG1的消化和抗體片段的后續(xù)純化。通過與 GingisKHAN 孵育，然后在 CaptureSelect? 人 CH1 離心柱上親和純化，在曲妥珠單抗上證明了完整的片段生成。樣品的酶和Fc部分存在于色譜柱的流通中，F(xiàn)ab很容易通過降低pH洗脫。使用該試劑盒，可以制備 0.5 mg 至 2 mg 人 IgG1 的 Fab 片段。Genovis同時提供IdeS酶的純化試劑盒。 上海IdeS蛋白酶抗體酶切Genovis提供的IgASAP Sub1+2 在鉸鏈上方的一個特定位點(diǎn)消化人 IgA1 和 IgA2m1，產(chǎn)生完整且均勻的 Fab 和 Fc 片段。

Genovis除了提供IdeS酶以外，還提供很多種特異性蛋白酶，如半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE）。IgdE 在鉸鏈正上方的一個特定位點(diǎn)消化人 IgG1，產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段的均質(zhì)池。它在pH值和鹽濃度范圍內(nèi)具有活性，不需要任何還原劑或輔助因子。因此，與許多其他常用的蛋白酶相比，F(xiàn)abALACTICA不需要任何優(yōu)化來避免過度消化。這使得FabALACTICA成為一種有吸引力的酶，例如在還原和非還原條件下的LC-MS分析、抗體高階結(jié)構(gòu)（HOS）的結(jié)晶和NMR研究、雙特異性或多特異性抗體的表征、單價結(jié)合研究和完整的Fc聚糖分析。

與IdeS不同，Romiplostim 由四個相同的血小板生成素 （TPO） 受體結(jié)合肽和一個 Fc 片段組成，通過柔性聚甘氨酸序列連接在一起。與度拉糖肽類似，用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 在 37°C 下過夜，或用 GlySERIAS 凍干 1 小時并在 37°C 下過夜消化該蛋白質(zhì)。 鏈間二硫鍵被還原，以便于通過反相LC-MS進(jìn)行以下分析。與度拉糖肽的觀察結(jié)果類似，用固定化酶消化產(chǎn)生均質(zhì)的 Fc/2，剩下一個連接子殘基，此處為甘氨酸殘基。這有助于識別專門位于Fc區(qū)域的修改。用凍干酶消化 1 小時得到 Fc/2，剩余 4 個甘氨酸殘基和少量的 Fc/2 仍與一個 TPO 肽連接。另一方面，這使得研究 Fc/2 和第yi個肽之間的連接區(qū)域成為可能，而不會受到第二個肽的干擾。用 GlySERIAS 凍干液過夜消化產(chǎn)生 2 個 Fc/2 變體，分別剩下 4 個和 1 個甘氨酸殘基。根據(jù)消化時間的不同，使用凍干產(chǎn)物釋放的肽以五或七種變體存在，接頭中殘留的甘氨酸殘基數(shù)量不同，而使用固定化產(chǎn)物釋放的肽以四種變體存在。用 Genovis的GlySERIAS Immobilized消化Romiplostim，產(chǎn)生均質(zhì)的 Fc/2。

與IdeS不同，Genovis的GingisREX（RgpB）是一種精氨酸特異性蛋白酶，可消化精氨酸殘基的C末端蛋白質(zhì)，包括難以與其他酶消化的Arg-Pro鍵。該酶可用于肽圖分析、從頭肽測序和翻譯后修飾分析。精氨酸殘基的特異性C-末端消化；在其他困難的精氨酸-脯氨酸序列中可靠消化；產(chǎn)生更長的肽-提高序列覆蓋率。GingisREX是一種半胱氨酸蛋白酶，可特異性地消化肽鍵C末端到精氨酸殘基，包括與脯氨酸相連的精氨酸。半胱氨酸是酶活性所必需的。與胰蛋白酶消化相比，可生成更長的肽，胰蛋白酶消化可以通過高分辨率質(zhì)譜進(jìn)行分離和鑒定。這為自下而上方法的樣品制備提供了更多選擇，以實(shí)現(xiàn)替代的酶解曲線和更高的序列覆蓋率。GingisREX在賴氨酸上沒有活性，通常使用Arg-C觀察到。該酶在5.0-9.0的寬pH值范圍內(nèi)具有活性，它需要半胱氨酸并被鹽酸胍抑制。該酶是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段，您需要另一種填料。上海IdeS蛋白酶抗體酶切

有一種檢測FabRICATOR（IdeS蛋白酶）酶的方法。了解有關(guān)山羊多克隆抗體 Anti-FabRICATOR 的更多信息。上海IdeS蛋白酶抗體酶切

與IdeS不同，Genovis的IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性蛋白酶，可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個特定位點(diǎn)消化人IgM，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。該酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人IgM進(jìn)行中級分析，從而促進(jìn)疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨(dú)特-可實(shí)現(xiàn)IgM的中級表征和質(zhì)量控制；快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的F（ab'）2和Fc片段；高度特異性–人IgM重鏈中的一個消化位點(diǎn)。IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性酶，可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個特定位點(diǎn)消化人IgM，產(chǎn)生F（ab'）2和Fc片段。消化在30分鐘內(nèi)完成，并且由于酶的特異性，如果孵育時間延長，則不存在過度消化的風(fēng)險。該酶在pH值為5.5至9.0時具有活性，不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下，但也可以在室溫下使用增加孵育時間進(jìn)行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為38kDa。上海IdeS蛋白酶抗體酶切