甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950

M-SAN HQ中鹽核酸酶，這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2 - 8.7），且在125 – 250 mM鹽濃度內(nèi)具有良好活性。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中，不需調(diào)整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)良好核酸酶活性。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對(duì)HCD的去除更高效、更徹底。Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ) 中鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。中鹽核酸酶具有純度高（≥99%）、 內(nèi)毒水平低（<0.25EU/1kU）的特點(diǎn)；甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950

上海倍篤生物科技有限公司（簡(jiǎn)稱“倍篤生物”），由中國(guó)科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士，于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個(gè)品牌的儀器、試劑及耗材，遵守相關(guān)法規(guī)要求，如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等，致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測(cè)研發(fā)等，藥物研發(fā)領(lǐng)域如細(xì)胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細(xì)胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù)，以期與客戶共同協(xié)作，加快研發(fā)及生產(chǎn)進(jìn)度，為客戶提供更多價(jià)值。福建M-SAN中鹽核酸酶70950-150瓊脂糖膠結(jié)果顯示，M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD消化成小于8nt的片段。

倫敦大學(xué)學(xué)院（UCL）的工藝開發(fā)團(tuán)隊(duì)，在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒（Lentivirus，LV）生產(chǎn)過程中，比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時(shí)間、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高、酶切時(shí)間更短，同時(shí)用納米顆粒分析（NTA）技術(shù)確認(rèn)M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少、穩(wěn)定性更高。他們會(huì)繼續(xù)探究HCD是否影響LV的穩(wěn)定性，及對(duì)LV侵染效率和生命周期是否有影響。通過更多研究，我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產(chǎn)的關(guān)鍵機(jī)制。

市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個(gè)規(guī)格，分別是25kU、500kU及5MU，分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測(cè)蛋白純度在99%以上。基于ArcticZymes Technologies的30年的酶學(xué)開發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，M-SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定，產(chǎn)品純度高，批次一致性好，無(wú)蛋白酶活性。廠家開發(fā)出特異的緩沖液體系，使M-SAN HQ保存起來(lái)更加穩(wěn)定，-15℃ - -30℃條件下保存4年沒有活性下降。研究數(shù)據(jù)表明，經(jīng)過5-6次的反復(fù)凍融，M-SAN HQ中鹽核酸酶活性沒有明顯變化。M-SAN HQ中鹽核酸酶在細(xì)胞培養(yǎng)鹽濃度下具有較高活性，縮短酶切時(shí)間、得到更短DNA片段；

通過三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體，會(huì)引入宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）、蛋白殘留（HCP）、工藝雜質(zhì)（如antibiotics、核酸酶等外源物質(zhì)）等污染，存在潛在的致瘤性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA。此外，根據(jù)雜質(zhì)來(lái)源、工藝以及產(chǎn)品類型不同，也會(huì)對(duì)HCD限度做不同要求。為了達(dá)到這個(gè)要求，一般通過核酸酶處理和色譜聯(lián)用的方法。一般在細(xì)胞培養(yǎng)液裂解/收獲、澄清收獲及超濾濃縮等環(huán)節(jié)加入核酸酶處理，需要工藝摸索來(lái)確認(rèn)處理方式。宿主細(xì)胞DNA主要以染色質(zhì)形態(tài)存在，其中組蛋白通過離子作用及疏水作用與DNA緊密結(jié)合；海南中鹽核酸酶70950-150

在150mM NaCl條件下，M-SAN HQ中鹽核酸酶的酶切活性達(dá)到常規(guī)核酸酶的5倍左右。甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950

一般來(lái)說，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo)）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀）的DNA和RNA。該酶來(lái)自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍（<100mM鹽濃度），且酶活隨著鹽濃度上升而下降，在300mM鹽濃度時(shí)酶活幾乎喪失。對(duì)于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV，LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在，而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下，Benzonase活性受到抑制。甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950