云南GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-14

Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評(píng)估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程,是評(píng)估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇,在海報(bào)“FabALACTICA產(chǎn)生純和均相的mAb亞基,促進(jìn)2D-NMR波譜分析”中進(jìn)行了描述。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質(zhì)量信號(hào)和光譜分辨率導(dǎo)致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結(jié)構(gòu)變化、氧化和非氧化樣品之間的差異,并通過觀察原子分辨率來比較原研劑和生物仿制藥的 HOS。Genovis的GingisREX (RgpB) 是一種精氨酸特異性蛋白酶。云南GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切

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上海倍篤生物科技有限公司(簡(jiǎn)稱“倍篤生物”),由中國(guó)科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士,于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個(gè)品牌的儀器、試劑及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相關(guān)法規(guī)要求,如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等,致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測(cè)研發(fā)等,藥物研發(fā)領(lǐng)域如細(xì)胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細(xì)胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù),以期與客戶共同協(xié)作,加快研發(fā)及生產(chǎn)進(jìn)度,為客戶提供更多價(jià)值。山東GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶Genovis的策略是幫助客戶進(jìn)行亞基分析,特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品,如IdeS蛋白酶。

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Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對(duì)處理兔IgG感興趣,請(qǐng)聯(lián)系Genovis團(tuán)隊(duì),我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡(jiǎn)單性、速度和可重復(fù)性也意味著這種酶可以被用于質(zhì)量控制應(yīng)用。 QC方法需要執(zhí)行簡(jiǎn)單,易于訓(xùn)練,高度可重復(fù),數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因?yàn)樗m用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進(jìn)行QC工作的客戶將能夠在未來的產(chǎn)品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。

對(duì)于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個(gè)可觸及的賴氨酸位點(diǎn)消化人IgG1,在足夠溫和的還原條件下保留鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵,從而產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段。對(duì)于融合蛋白,消化通常在鉸鏈上方獲得,但融合伴侶的結(jié)構(gòu)和氨基酸序列可能導(dǎo)致其他暴露的消化位點(diǎn)。如果去除保守的 Fc N-聚糖,F(xiàn)c 中的第二個(gè)切割位點(diǎn)也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時(shí),并通過 HPLC 進(jìn)行分析。但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料。

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用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1和IgA2m1,產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長(zhǎng),因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點(diǎn)的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時(shí)間為過夜(16-18小時(shí)),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為6.0至8.0時(shí)具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性。活性為37°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,使用LC-MS進(jìn)行中級(jí)分析。遼寧FabALACTICAIdeS蛋白酶抗體酶切

FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得比較好的活性。云南GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對(duì)IgG進(jìn)行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質(zhì)譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動(dòng)化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測(cè)應(yīng)用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設(shè)置的一部分,將反應(yīng)器直接耦合到MS。這種自動(dòng)化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時(shí)間、樣品處理時(shí)間并提高了通量。云南GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切