上海靶向捕獲高通量測序測序

來源: 發(fā)布時間:2022-08-22

對于微生物樣品,請客戶如實聲明所屬物種;對于可能致病的微生物,生工將拒收。以固體培養(yǎng)基培養(yǎng)的樣品,需將樣品從培養(yǎng)基上刮取下來,用干冰寄送;以液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的樣品,需離心后棄培養(yǎng)液收集樣品,用RNA組織保存液(例如RNA-Be-Locker A)保存,以干冰或冰袋寄送;沒有RNA組織保存液的情況下,也可用液氮或干冰乙醇速凍,保存于-80°C 冰箱,埋于足量干冰寄送。***樣品送樣量需至少達到100 mg/樣;細菌樣品送樣量需至少達到107(10的7次方)數(shù)量級,同時,在與樣本一同寄送的送樣表上,標明屬于革蘭氏陽性菌(G+)還是革蘭氏陰性菌(G-)。請寄送樣本(尤其是細胞樣本)之前鑒定樣本所屬物種。上海靶向捕獲高通量測序測序

懸液制備好后質(zhì)檢結(jié)果的判斷也是大家需要掌握的必備技能。單細胞懸液質(zhì)檢關(guān)卡究竟是怎樣運作的呢?單細胞懸液質(zhì)控要求:?細胞濃度:700-1200cells/μl;?細胞活率>80%(當(dāng)細胞懸液活率低于70%時建議進行去除死細胞處理);細胞團及碎片雜質(zhì)<5%(無細胞粘連,無明顯的細胞碎片和細胞團,并保證細胞的完整性);?細胞狀態(tài):細胞直徑在7-40um之間(細胞直徑過大則建議進行抽核處理);?不存在逆轉(zhuǎn)錄抑制劑和非細胞的核酸分子。多重擴增高通量測序原理10xGenomics Chromium X多通道+高捕獲+10x的CellPlex多樣本混樣技術(shù)。

單細胞懸液質(zhì)檢方法,在進行單細胞懸液質(zhì)檢時,需要用到以下兩大質(zhì)檢利器的輔助:熒光細胞計數(shù)儀(主要使用臺盼藍和雙熒光AO/PI染色法)進行質(zhì)檢。首先我們先要了解一下細胞質(zhì)檢時染料染色的原理:臺盼藍染色原理:臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不被染色。而死細胞的細胞膜透性增高,可使染料進入細胞內(nèi)而使死細胞染成淡藍色。熒光細胞計數(shù)儀檢測結(jié)果可以讓我們直觀的看到:細胞濃度(總細胞,活細胞,死細胞)、細胞存活率(臺盼藍和雙熒光AO/PI染色)、細胞平均直徑、細胞聚團率、細胞直徑分布等結(jié)果的展示。

簡化基因組測序,項目介紹:通過限制性內(nèi)切酶對基因組DNA進行酶切,并對酶切片段進行高通量測序,這種通過酶切降低基因組的復(fù)雜度的測序技術(shù)統(tǒng)稱為簡化基因 組測序技術(shù)。利用生物信息學(xué)方法,進行SNP單體型圖譜繪制,全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS),連鎖分析和QTL定位分析,種群進化,主成分分析等。比較有代表性的方法有GBS-seq和RAD-seq。宏全基因組測序,項目介紹:宏基因組指特定環(huán)境樣品內(nèi)全部遺傳物質(zhì)的總和。直接提取環(huán)境樣品內(nèi)全部基因組DNA,隨后進行大規(guī)模高通量測序(shotgun 策 略)。測到數(shù)據(jù)后,先進行必要的數(shù)據(jù)質(zhì)控,而后進行基因組拼接、注釋(物種、基因功能),使得我們可以獲取環(huán)境樣品內(nèi)菌群分布、系統(tǒng)進化、功能代謝等信息。該方法已經(jīng)得到普遍的運用。單細胞測序到底是什么?

生工其他PCR產(chǎn)物測序,項目介紹:隨著基因編輯技術(shù)(尤其是CRISPR-cas9技術(shù))的發(fā)展,科研人員使用傳統(tǒng)的Sanger測序無法快速有效鑒定基因編輯效率。但是,通過對靶基因區(qū)域附近設(shè)計引物,進行PCR擴增,并對PCR產(chǎn)物進行高通量測序,可以快速高效的獲得目標區(qū)域的突變頻率信息,尤其是對低頻突變的檢測效果遠遠優(yōu)于一代測序,性價比極高。總DNA 或者包裝完好的原始樣品(如土壤、糞便、 水體和口腔物);樣品名稱清晰,冷藏運輸。如有對照與實驗樣品的區(qū)分,標明正常樣品與實驗樣品,如有分組,詳細描述分組分析信息,以及分組比較的分析需求信息。高通量測序技術(shù)是可以平行對數(shù)百萬甚至數(shù)十億條序列測序的技術(shù)。上海微生物高通量測序測序

X儀器本身有16個通道(Controller為8通道),每個通道極限多捕獲20000個細胞(Controller為10000個細胞) 。上海靶向捕獲高通量測序測序

單細胞測序是什么?單細胞測序是基于高通量測序(Next-generationsequencingtechnology,NGS)方法,檢測群體中單細胞基因組、單細胞轉(zhuǎn)錄組、單細胞表觀基因組及單細胞蛋白組,提供細胞間差異的高分辨率視圖,從分子水平揭示細胞奧秘。單細胞轉(zhuǎn)錄組測序(Single-cellRNA-Sequencing,ScRNA-Seq)指在單細胞水平上對mRNA進行高通量測序和分析的技術(shù)。單細胞轉(zhuǎn)錄組測序能獲得單個細胞內(nèi)近萬個基因的表達信息,為辨別生物組織中各種細胞類型的轉(zhuǎn)錄組特征和全方面揭示細胞之間基因表達的異質(zhì)性提供了有力的工具[3]。說到細胞異質(zhì)性(Cellheterogeneity),就要說到我們?yōu)槭裁匆脝渭毎麥y序技術(shù)了。上海靶向捕獲高通量測序測序

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