病毒基因組測序:病毒基因組測序包括完成圖測序、掃描圖測序和重測序三個(gè)層面,通過二代/三代測序平臺(tái),獲得病毒的基因組的序列信息,并在結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、比較基因組學(xué)層面通過差異分析、同源基因分析、共線性分析、物種進(jìn)化分析等手段探究病毒的毒力系統(tǒng)、基因組的進(jìn)化與演變歷程等。對疑似傳染標(biāo)本采集提取后直接進(jìn)行高通量測序,通過病原微生物專門用的數(shù)據(jù)庫比對和智能化算法分析,獲得疑似致病微生物種屬信息,并提供全方面深入的報(bào)告,為疑難危重傳染提供快速準(zhǔn)確診斷依據(jù),促進(jìn)藥物的合理應(yīng)用。病毒全基因組測序產(chǎn)品特點(diǎn):病原診斷更準(zhǔn)確。RNA病毒序列測序進(jìn)化分析要多久
未培養(yǎng)病毒基因組的標(biāo)準(zhǔn):①關(guān)于未培養(yǎng)病毒基因組標(biāo)準(zhǔn)的信息是在基因組標(biāo)準(zhǔn)框架內(nèi)制定的,包括病毒起源、基因組質(zhì)量、基因組注釋、分類信息、生物地理分布和宿主預(yù)測;②UViGs有助于提高我們對病毒進(jìn)化歷史和病毒-宿主之間相互作用的理解;③病毒基因組組成和內(nèi)容、復(fù)制策略和宿主的異常多樣性意味著UViGs的完整性、質(zhì)量、分類學(xué)和生態(tài)學(xué)需要通過病毒特異性指標(biāo)來評(píng)估;④分析不同大小和不同樣品類型的UViGs對于探索病毒基因組序列空白是有價(jià)值的。武漢全基因組測序分析檢測病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):無需培養(yǎng)和特異性擴(kuò)增,對采集臨床樣本直接檢測。
二代測序可以用于對病毒的全基因組進(jìn)行測序有哪些挑戰(zhàn)?二代測序相較sanger測序,差異主要就是單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量,因此也稱為高通量測序。想要通過高通量測序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。而高通量測序技術(shù)本身并不是以病毒為目標(biāo)開發(fā)的,因此每個(gè)環(huán)節(jié)都是挑戰(zhàn)。核酸純化步驟決定了Input核酸的起始濃度和總量,從而決定了文庫構(gòu)建的成敗、質(zhì)量和產(chǎn)量;文庫的好壞決定了數(shù)據(jù)的質(zhì)量和產(chǎn)出;而數(shù)據(jù)的質(zhì)量產(chǎn)出直接影響分析結(jié)果。樣品一般核酸濃度很低,且?guī)в写罅克拗魑廴荆虼藢?shí)驗(yàn)部分和分析部分都比較困難。探普生物基于這些困難點(diǎn),進(jìn)行了大量有針對性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。
病毒全基因組測序定:測序深度,測序得到的堿基總量(bp)與基因組大?。℅enome)的比值,它是評(píng)價(jià)測序量的指標(biāo)之一。測序深度(SequencingDepth):測序得到的堿基總量(bp)與基因組大?。℅enome)的比值,它是評(píng)價(jià)測序量的指標(biāo)之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個(gè)正相關(guān)的關(guān)系,測序帶來的錯(cuò)誤率或假陽性結(jié)果會(huì)隨著測序深度的提升而下降。重測序的個(gè)體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測序深度在10~15X以上時(shí),基因組覆蓋度和測序錯(cuò)誤率控制均得以保證。測序的完成程度,決定著基因組的下游應(yīng)用。
病毒是由一種核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)(Protein)構(gòu)成或只由蛋白質(zhì)構(gòu)成(如朊病毒)。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成,可分為單鏈DNA病毒(ssDNA)、雙鏈DNA病毒(dsDNA)、單鏈RNA病毒(ssRNA)、雙鏈RNA病毒(dsRNA)和蛋白質(zhì)病毒(如朊病毒)。根據(jù)宿主類型的不同,可以分為噬菌體(細(xì)菌病毒)、植物病毒(煙花葉病毒)和動(dòng)物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因組測序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量測序技術(shù),對病毒全基因組進(jìn)行測序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列,解析編碼信息,并獲得相應(yīng)的變異信息。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長。病毒序列測序突變分析方法
測序覆蓋度是反映測序隨機(jī)性的指標(biāo)之一。RNA病毒序列測序進(jìn)化分析要多久
深度測序數(shù)據(jù):目前深度測序數(shù)據(jù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域數(shù)量增加快、應(yīng)用廣的數(shù)據(jù),對這些數(shù)據(jù)的管理、分析和應(yīng)用給生物信息學(xué)帶來了巨大的挑戰(zhàn)。早期的測序技術(shù)是“測定沒有計(jì)算快”,下一代測序技術(shù)發(fā)展以來,變?yōu)槿缃竦摹坝?jì)算沒有測定快”。深度測序數(shù)據(jù)的迅猛增長使得數(shù)據(jù)科學(xué)分析方面的人才十分缺乏,深度測序和大數(shù)據(jù)處理都是新生事物,將深度測序數(shù)據(jù)應(yīng)用到臨床更需要數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)、計(jì)算機(jī)和生物、臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的多學(xué)科交叉的高級(jí)人才。測序深度是測序量除以基因組長度,例如測序深度10*就相當(dāng)于測了10次的全基因組。RNA病毒序列測序進(jìn)化分析要多久
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