近年來藥品不安全事故不斷發(fā)生,并呈上升趨勢(shì)。在藥品質(zhì)量事故的高發(fā)期,強(qiáng)化藥品微生物鑒定工作顯得尤為重要,尤其是無菌藥品。在無菌藥品的生產(chǎn)中,對(duì)原料、輔料、包裝材料、生產(chǎn)場(chǎng)所、生產(chǎn)過程的微生物控制是保證藥品質(zhì)量的基礎(chǔ),所以利用微生物鑒定技術(shù)快速、準(zhǔn)確地獲得鑒定結(jié)果,對(duì)當(dāng)前無菌藥品微生物鑒定工作來說非常重要。PCR技術(shù)能夠鑒定出藥品中含有診療大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及李斯特桿菌多種成分,相關(guān)**學(xué)者在還沒有經(jīng)過富集化培養(yǎng)就采用免疫磁珠并結(jié)合PCR技術(shù),準(zhǔn)確并快速對(duì)藥品進(jìn)行檢測(cè),確定了藥品中含有李斯特菌和大腸埃希氏菌成分;還有有關(guān)**采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)菌株,確定藥品中多數(shù)菌株呈陰性,而有少量溶血弧菌呈陽性。生化方法檢測(cè)病原微生物實(shí)際上是測(cè)定微生物特異性酶。成都未知病毒鑒定上哪找
對(duì)于無菌藥品生產(chǎn)來說生產(chǎn)區(qū)域的微生物種類非常有限,更具無菌藥品的具體生產(chǎn)內(nèi)容和過程,潔凈區(qū)內(nèi)會(huì)有芽孢桿菌占絕大多數(shù)酵母菌、霉菌和葡萄球菌少量存在,放射根瘤菌、苛養(yǎng)顆粒鏈菌等少數(shù)微生物種類。在無菌藥品生產(chǎn)過程中,應(yīng)初步建立微生物數(shù)據(jù)庫,建立潔凈區(qū)微生物數(shù)據(jù)庫是追溯潔凈區(qū)微生物污染來源的有效方法,有效指導(dǎo)并控制無菌藥品生產(chǎn)中的污染問題。同時(shí),為防止微生物污染,通過微生物數(shù)據(jù)庫并結(jié)合一些常規(guī)方管理法,比如對(duì)污染源及其途徑進(jìn)行了解,并進(jìn)行微生物限度檢查,控制藥品質(zhì)量。注意在潔凈區(qū)的人員數(shù)量應(yīng)控制好,并要求人員具有自我約束的意識(shí)等,從而有效控制潔凈區(qū)微生物。在生產(chǎn)中應(yīng)用微生物鑒定技術(shù)和檢測(cè)設(shè)備向微型化以及多功能化方向發(fā)展,更具有較快的檢測(cè)速度以及更為準(zhǔn)的鑒定結(jié)果。RNA新病原篩查檢測(cè)有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)是無法鑒別的。
微生物鑒定方法:首先呢,就是從觀察顯微鏡下甚至光鏡下的微生物的的那個(gè)細(xì)胞的形態(tài),比如說,是球菌,還是桿菌,還是弧菌,還是螺旋菌,這都是可以從微生物的單個(gè)細(xì)胞形態(tài)上區(qū)分的。還有就是細(xì)胞的形態(tài),比如說是否有鞭毛、芽孢之類的東西,都是微生物鑒別的特征性特征。其次呢就是觀察細(xì)菌的菌落形態(tài),因?yàn)榧?xì)菌生長繁殖到一定階段大多都是以菌群的形態(tài)存在的,不同的細(xì)菌菌落在不同的培養(yǎng)基上的生長情況不同,部分細(xì)菌對(duì)培養(yǎng)基要求較高,部分培養(yǎng)基能在特定的培養(yǎng)基上生存,通過微生物對(duì)不同類型培養(yǎng)基的適應(yīng)性,可以起到對(duì)菌種的有效區(qū)分。
病毒鑒定常用方法有哪些?病原學(xué)檢測(cè)主要適用于急性期血液標(biāo)本,一般認(rèn)為發(fā)病7天內(nèi)檢測(cè)陽性率高。(1)核酸檢測(cè):采用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測(cè)手段。(2)病毒分離:將標(biāo)本接種于蚊源細(xì)胞(C6/36)或哺乳動(dòng)物細(xì)胞(BHK21、Vero)進(jìn)行分離培養(yǎng),出現(xiàn)病變以后,用檢測(cè)核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進(jìn)行病毒分離。血清學(xué)檢測(cè):(1)血清特異性IgM抗體:發(fā)病3天后可檢出病毒特異IgM抗體,但發(fā)病7天后檢出率高??刹捎肊LISA、免疫熒光等方法檢測(cè)。IgM抗體陽性,提示患者可能新近寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強(qiáng)的交叉反應(yīng),易于產(chǎn)生假陽性。(2)中和抗體:采用空斑減少中和試驗(yàn)方法檢測(cè)?;颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒,可以確診。微生物檢測(cè)中含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物。
鑒定未知病原體的技術(shù)有哪些?快速測(cè)試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體,將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面,通過微生物在上面的生長、顯色來測(cè)定食品中微生物的方法。細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)紙片的研制始于20世紀(jì)80年代,其主要優(yōu)點(diǎn)是簡便、實(shí)用、經(jīng)濟(jì)、操作性強(qiáng)。近年來以濾紙Petrifilm為載體的測(cè)試片已開始被普遍應(yīng)用。每個(gè)人一生中可能受到150種以上的病原體,在人體免疫功能正常的條件下并不引起疾病,有些甚至對(duì)人體有益,如腸道菌群(大腸桿菌等)可以合成多種維生素。為了食品的安全,人們的健康,微生物檢測(cè)極其必要。安徽未知病原微生物鑒定上哪找
常用的病毒檢測(cè)方法有3種,植物直接測(cè)定法、指示植物測(cè)定法、血清學(xué)方法。成都未知病毒鑒定上哪找
傳統(tǒng)病原微生物檢測(cè)方法:隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展,病原學(xué)診斷已不再局限于病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測(cè)手段不斷出現(xiàn)并被應(yīng)用于臨床和實(shí)驗(yàn)。核酸分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、基因芯片技術(shù)、高通量測(cè)序技術(shù)等檢測(cè)方法,自動(dòng)化程度高,快速省時(shí)、無污染、結(jié)果精確,可以準(zhǔn)確靈敏地鑒定病原微生物。傳統(tǒng)的病原微生物的檢測(cè)方法有:直接涂片鏡檢、分離培養(yǎng)與生化反應(yīng)、組織細(xì)胞培養(yǎng)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)、基因檢測(cè)(核酸雜交技術(shù)、基因芯片技術(shù)、PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴(kuò)增法等)。成都未知病毒鑒定上哪找
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