病毒全基因組測(cè)序定在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。深度測(cè)序數(shù)據(jù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域數(shù)量增加快、應(yīng)用廣的數(shù)據(jù)。RNA全基因組病毒二代測(cè)序技術(shù)
病毒基因組測(cè)序的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)是:測(cè)序的完成程度,決定著基因組的下游應(yīng)用,包括設(shè)計(jì)診斷產(chǎn)品、反向遺傳系統(tǒng)以及開(kāi)發(fā)調(diào)整對(duì)策等?;蚪M是生物體內(nèi)的遺傳物質(zhì),以DNA或RNA的形式編碼。病毒基因組包括基因和一些非編碼的DNA或RNA序列,含有病毒復(fù)制和傳播所必需的信息。因此,確定這些序列可以獲得寶貴的信息,可以應(yīng)用于各種醫(yī)學(xué)和科研領(lǐng)域。高通量測(cè)序技術(shù)飛速發(fā)展,現(xiàn)在幾乎所有的病毒研究方向都涉及了測(cè)序,包括分子流行病學(xué)、藥物和疫苗開(kāi)發(fā)、病毒的監(jiān)控與診斷等等。DNA二代測(cè)序分析價(jià)格高通量測(cè)序技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)測(cè)序一次**性的改變。
新一代測(cè)序中基因從頭測(cè)序和重測(cè)序有什么區(qū)別?從頭測(cè)序的原理是生成互相分離的若干組帶放射性標(biāo)記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點(diǎn),但卻隨機(jī)終止于特定的一種或者多種殘基上??梢詤^(qū)分長(zhǎng)度只差一個(gè)核苷酸的不同DNA分子的條件下,對(duì)各組寡核苷酸進(jìn)行電泳分析,只要把幾組寡核苷酸加樣于測(cè)序凝膠中若干個(gè)相鄰的泳道上。全基因組重測(cè)序是對(duì)已知基因組序列的物種進(jìn)行不同個(gè)體的基因組測(cè)序,并在此基礎(chǔ)上對(duì)個(gè)體或群體進(jìn)行差異性分析。SBC將不同梯度插入片段的測(cè)序文庫(kù)結(jié)合短序列、雙末端進(jìn)行測(cè)序,幫助客戶在全基因組水平上掃描并檢測(cè)與重要性狀相關(guān)的基因序列差異和結(jié)構(gòu)變異,實(shí)現(xiàn)遺傳進(jìn)化分析及重要性狀候選基因預(yù)測(cè)。
深度測(cè)序技術(shù)對(duì)社會(huì)具有的影響:深度測(cè)序技術(shù)促進(jìn)了基因檢測(cè)的普及,對(duì)社會(huì)的影響第1個(gè)方面反映在商業(yè)模式的變化,即醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和健康管理方面的平民化、個(gè)性化趨勢(shì)的形成。社會(huì)生活受到深度測(cè)序技術(shù)影響的第二個(gè)方面是基因測(cè)序的普遍應(yīng)用。例如,基因關(guān)聯(lián)將人與人通過(guò)遺傳學(xué)關(guān)聯(lián)起來(lái),人們可以對(duì)基因進(jìn)行分析判定親緣關(guān)系,基因測(cè)定甚至可以幫助判定婚姻(包括遺傳病等方面的)匹配度。公安機(jī)關(guān)可以通過(guò)基因比對(duì),鎖定犯罪嫌疑人、尋找丟散的兒童和親人。甚至有報(bào)道表明,測(cè)定20多個(gè)基因就可以將人臉重構(gòu)。基因檢測(cè)的應(yīng)用將隨著基因-表型的關(guān)聯(lián)得到更普遍的應(yīng)用,對(duì)社會(huì)生活的方方面面起到重要作用。全基因組測(cè)序能檢測(cè)個(gè)體基因組中的全部遺傳信息,準(zhǔn)確性高。
二代測(cè)序應(yīng)用的患者類(lèi)型的推薦:共識(shí)明確指出了二代測(cè)序應(yīng)用的患者類(lèi)型及使用的時(shí)機(jī)的意見(jiàn):對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染/血流傳染/呼吸道傳染患者,3天是二代測(cè)序使用的時(shí)機(jī),在傳統(tǒng)方法(常規(guī)的生化檢查和培養(yǎng))3天未報(bào)陽(yáng)性且經(jīng)驗(yàn)性調(diào)整無(wú)效時(shí),強(qiáng)烈推薦二代測(cè)序檢測(cè);對(duì)疑似病毒傳染患者,包括:疑似神經(jīng)系統(tǒng)病毒傳染和病毒性肺炎且病情持續(xù)進(jìn)展的患者,若完善傳統(tǒng)PCR檢測(cè)后依然未獲得明確的病原學(xué)證據(jù)時(shí),強(qiáng)烈推薦二代測(cè)序檢測(cè)。對(duì)于疑似局灶性傳染患者完成常規(guī)的生物化學(xué)、培養(yǎng)或PCR檢測(cè)后,若未能獲取病原學(xué)診斷結(jié)果,推薦將二代測(cè)序作為檢測(cè)方法。而對(duì)于懷疑繼發(fā)性血流傳染患者:在原發(fā)傳染灶的病原學(xué)檢測(cè)為陰性或因各種因素?zé)o法送檢合適標(biāo)本的情況下,可考慮將血標(biāo)本的二代測(cè)序檢測(cè)作為二線檢測(cè)。病毒株都需要獲得盡量完整的基因組序列來(lái)指導(dǎo)下一步的研究。RNA全基因組病毒二代測(cè)序技術(shù)
病毒全基因組測(cè)序產(chǎn)品特點(diǎn):對(duì)采集臨床樣本直接檢測(cè)。RNA全基因組病毒二代測(cè)序技術(shù)
病毒全基因組測(cè)序注意事項(xiàng):病毒全基因組測(cè)序,測(cè)序覆蓋度,基因組被測(cè)序得到的堿基覆蓋的比例;測(cè)序覆蓋度是反映測(cè)序隨機(jī)性的指標(biāo)之一;測(cè)序序深度與覆蓋度之間的關(guān)系可以過(guò)Lander-WatermanModel(1988)來(lái)確定。當(dāng)深度達(dá)到5X時(shí),則可覆蓋基因組的約99.4%以上。通過(guò)生物信息手段,分析不同個(gè)體基因組間的結(jié)構(gòu)差異,同時(shí)完成SNP及基因組結(jié)構(gòu)注釋。DNA突變可誘發(fā)病癥。吸煙過(guò)程中所釋放的>60種致病化學(xué)物質(zhì)可與DNA結(jié)合并對(duì)DNA鏈上的鳥(niǎo)嘌呤和腺嘌呤進(jìn)行化學(xué)修飾從而產(chǎn)生大的加合物,該加合物改變了DNA雙螺旋的結(jié)構(gòu),如果不被核苷酸剪切修復(fù)或其他的途徑進(jìn)行糾正,那么DNA在復(fù)制時(shí)就會(huì)按照non-Watson-Crick方式進(jìn)行復(fù)制并阻止RNA聚合酶進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。RNA全基因組病毒二代測(cè)序技術(shù)
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