江蘇口腔微生物多樣性測序分析

一直以來宏基因組技術(shù)都是在細菌領(lǐng)域使用，病毒的樣本收集困難、文庫構(gòu)建繁瑣、數(shù)據(jù)庫不完善，因此宏基因組技術(shù)未能獲得普遍應(yīng)用。生物進行病毒宏基因組測序，樣品具備什么條件才可以獲得比較質(zhì)量的宏基因組分析效果？其他公司對用于測序的樣本的要求較高。而在探普生物進行病毒宏基因組測序，基于探普的專有流程，樣本要求非常低，不要求總量到達微克，探普有專門的收樣標準和送樣流程。為了保證后續(xù)數(shù)據(jù)的有效利用率，需要客戶配合完成合格的取樣步驟和樣本前處理步驟。當然探普也提供適當?shù)臉颖咎幚矸?wù)。核酸性質(zhì)有RNA和DNA之分，核酸鏈還有單雙鏈之分，而核酸本質(zhì)不同和單雙鏈的不同，進行同樣的實驗步驟其效率也不一樣。面對未知病毒，抵抗力是我們健康的屏障。江蘇口腔微生物多樣性測序分析

病毒是地球上數(shù)量多的生物實體，其中細菌病毒(即噬菌體)約有1031個類群，從海洋到陸地再到人體幾乎都是它們的棲息地。研究者將病毒視為調(diào)節(jié)人類生態(tài)系統(tǒng)的重要成員，人體內(nèi)主要包括真核病毒和噬菌體，包括雙鏈DNA(double-strandedDNA,dsDNA)，單鏈DNA(single-strandedDNA,ssDNA)和RNA病毒。隨著對病毒研究的普遍開展，“病毒組”與“病毒組學”的概念也應(yīng)運而生，這些術(shù)語分別涵蓋了棲息在生態(tài)系統(tǒng)中的所有病毒及其基因組和對它們的研究(LefkowitzEJ,etal,2017)。根據(jù)病毒不同的特征進行分類，包括病毒的宿主范圍；病毒的形態(tài)學；病毒的基因組大小；病毒的核酸組成成分以及病毒的致病性。雖然所有的性狀在病毒分類學的確定中都很重要，但目前利用平均核苷酸同源性（ANI）和系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系進行序列比較被視為定義和區(qū)分病毒群類的主要標準。江蘇口腔微生物多樣性測序分析傳統(tǒng)Sanger測序相比,NGS技術(shù)的發(fā)展使得一個小的研究小組可以擁有大量病毒株的全基因組序列。

病毒宏基因組測序又稱宏病毒組(Virome),是在宏基因組學理論的基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)有的病毒分子生物學檢測技術(shù)而興起的一個新的學科分支。而所謂宏基因組學(metagenomics)就是一種以環(huán)境樣品中的微生物群體基因組為研究對象,以功能基因篩選和測序分析為研究手段,以微生物多樣性、種群結(jié)構(gòu)、進化關(guān)系、功能活性、相互協(xié)作關(guān)系及與環(huán)境之間的關(guān)系為研究目的的新的微生物研究方法。一般包括從環(huán)境樣品中提取基因組DNA,克隆DNA到合適的載體,導(dǎo)入宿主菌體,篩選目的轉(zhuǎn)化子等工作。

近年來，隨著測序技術(shù)的發(fā)展，對微生物群（微生物組）的研究逐漸加深，研究熱點越來越多集中于環(huán)境和生物體相互作用的微生物群。加之測序成本降低，分析技術(shù)不斷提升，都使得宏基因組測序技術(shù)得到普遍應(yīng)用。為什么要做宏基因組：宏基因組相對16S來說其物種分辨率會更高，隨著物種測序完成越來越多，數(shù)據(jù)庫更加完善，在腸道菌群方面基本能實現(xiàn)97%以上的菌都能鑒定到種，90%以上到菌株層面。而且可以同時獲得除RNA病毒外的所有物種的分布。此外包括菌基因組CNV等方法的出現(xiàn)，可以直接通過大規(guī)模宏基因組測序不僅找到可能的菌，進一步還能鑒定出特定候選基因區(qū)段。宏基因組測序能夠檢測出新發(fā)和罕見病原體。

病毒宏基因組學的研究過程主要包括以下3個步驟：樣品的處理、病毒宏基因組學文庫構(gòu)建和數(shù)據(jù)分析與處理。樣品的制備較關(guān)鍵的是樣品的處理、遺傳物質(zhì)的分離和富集。樣品的制備關(guān)鍵應(yīng)做到提取能夠表示該環(huán)境的高純度樣本，并除去非病毒核酸細胞和遺傳物質(zhì)的干擾。富集微生物及去除非目的性的細胞和遺傳物質(zhì)是分離高質(zhì)量的遺傳物質(zhì)的前提，提取高純度的表示特定環(huán)境中的遺傳物質(zhì)是宏基因組學研究過程中的難題。正切流過濾系統(tǒng)、差異過濾、梯度離心、空心纖維過濾、DNA酶和RNA酶處理、序列非依賴的單引物擴增（Sequence-independentsingleprimeramplification，SISPA）等技術(shù)可用于樣品的制備，而SYBR金染色法可用于實時監(jiān)測處理樣品中病毒顆粒的數(shù)量。微生物鑒定可以用微生物對噬菌體的敏感性零作為指標來鑒定微生物的種屬。微生物群體多樣性測序公司

探普生物具備處理大量多樣的病毒樣本的經(jīng)驗，熟知各類病毒樣本的特性，對于樣本準備有獨特的方法指南。江蘇口腔微生物多樣性測序分析

上海探普生物科技有限公司對樣本進行宏病毒組測序有什么優(yōu)勢？全國開設(shè)病毒宏基因組測序的公司不超過3家，只有探普生物是專門為病毒研究者服務(wù)的，探普生物的研發(fā)團隊和實驗團隊都來自全國各地病毒學、微生物學專業(yè)的高校，碩士及以上學歷成員超過60%，團隊具備普通測序?qū)嶒灪头治龌A(chǔ)之外，同時具備病毒學及微生物學的學術(shù)背景，相當了解病毒相關(guān)樣本情況、研究方向等。研究者在項目咨詢的時候就可以明顯感覺到探普生物的專業(yè)性，溝通順暢，省時又省力。江蘇口腔微生物多樣性測序分析