有哪些技術(shù)手段能實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序呢？早期在高通量測(cè)序技術(shù)普及之前，對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序是通過(guò)非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測(cè)序來(lái)完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后，可以通過(guò)特異性擴(kuò)增+sanger測(cè)序獲得全基因組序列。Sanger測(cè)序準(zhǔn)確度高，讀長(zhǎng)很長(zhǎng)，但與此同時(shí)，擴(kuò)增和克隆工作費(fèi)時(shí)費(fèi)力，由于流程繁瑣，加上快速變異導(dǎo)致引物無(wú)法通用，該方法對(duì)于大量基因組的測(cè)序工作而言，可操作性不強(qiáng)，這對(duì)于研究者一直是一個(gè)困擾。高通量測(cè)序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測(cè)序和分析，減少了工作量，增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測(cè)試，開(kāi)發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序，該流程自運(yùn)行以來(lái)廣受研究者們好評(píng)。 在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中，接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。杭州病毒序列測(cè)序分析檢測(cè)
病毒準(zhǔn)種的漂變將使毒株的特點(diǎn)及傳播方式發(fā)生改變，給現(xiàn)有的檢測(cè)手段和防治措施帶來(lái)嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。新一代高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)使得檢測(cè)某個(gè)物種的混合PCR產(chǎn)物中低頻率的變異體十分便利它的出現(xiàn)加快了研究準(zhǔn)種的規(guī)律性和影響因素的步伐。新一代測(cè)序儀將以往的測(cè)序費(fèi)用降低了好幾個(gè)數(shù)量級(jí)。鑒于此，以前只有大型測(cè)序中心才能夠開(kāi)展的項(xiàng)目，現(xiàn)在在小型實(shí)驗(yàn)室里也能順利進(jìn)行了，按照目前的發(fā)展速度，新一代高通量測(cè)序技術(shù)有望給生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域帶來(lái)**性的變革。二代測(cè)序分析技術(shù)全國(guó)開(kāi)設(shè)病毒相關(guān)測(cè)序的公司不超過(guò)5家。
對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序時(shí)，生物信息學(xué)分析工作的進(jìn)行：生存環(huán)境和狀態(tài)決定病毒的狀態(tài)，病毒的全基因組測(cè)序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn)，優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫(kù)，搭載了專(zhuān)門(mén)用的的生物信息學(xué)分析流程，可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。探普生物基于該特點(diǎn)，優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫(kù)，專(zhuān)門(mén)搭載了生物信息學(xué)分析流程，可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。生物信息學(xué)流程主要包括對(duì)非目標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行去除以及對(duì)目標(biāo)序列進(jìn)行篩選，高質(zhì)量高完整度的序列拼接以及后續(xù)的高級(jí)分析，如SNP分析，進(jìn)化分析，耐藥位點(diǎn)分析等。在探普的專(zhuān)門(mén)用的流程下，可以獲得完整性很高的基因組序列。
病毒基因組測(cè)序包括完成圖測(cè)序、掃描圖測(cè)序和重測(cè)序三個(gè)層面，通過(guò)二代/三代測(cè)序平臺(tái)，獲得病毒的基因組的序列信息，并在結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、比較基因組學(xué)層面通過(guò)差異分析、同源基因分析、共線性分析、物種進(jìn)化分析等手段探究病毒的毒力系統(tǒng)、基因組的進(jìn)化與演變歷程等。對(duì)疑似傳染標(biāo)本采集提取后直接進(jìn)行高通量測(cè)序，通過(guò)病原微生物數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)和智能化算法分析，獲得疑似致病微生物種屬信息，并提供全方面深入的報(bào)告，為疑難危重傳染提供快速準(zhǔn)確診斷依據(jù)，促進(jìn)藥物的合理應(yīng)用。二代測(cè)序單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量，因此也稱(chēng)為高通量測(cè)序。
哪些應(yīng)用場(chǎng)景需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序？在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中，我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先，從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi)，同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外，有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組，可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測(cè)序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列。國(guó)內(nèi)病毒高通量測(cè)序進(jìn)化分析要多久
病毒全基因組測(cè)序具有的特點(diǎn):獨(dú)有的一定定量技術(shù),實(shí)現(xiàn)病原定量分析!杭州病毒序列測(cè)序分析檢測(cè)
探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的實(shí)驗(yàn)基于二代測(cè)序技術(shù)。樣本經(jīng)過(guò)核酸純化-文庫(kù)構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先，在核酸純化環(huán)節(jié)，探普提供專(zhuān)門(mén)針對(duì)性的核酸純化樣本指南，以提高目的物種的核酸純度和得率，與此同時(shí)探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二，文庫(kù)構(gòu)建環(huán)節(jié)，樣本的核酸具備濃度低，總量少的特點(diǎn)。探普生物專(zhuān)門(mén)針對(duì)這一點(diǎn)開(kāi)發(fā)了超微量核酸文庫(kù)構(gòu)建，可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測(cè)序文庫(kù)。第三，生物信息學(xué)分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn)，優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫(kù)，搭載了的生物信息學(xué)分析流程，可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。杭州病毒序列測(cè)序分析檢測(cè)