目前構建的病毒宏基因組學文庫主要有載體克隆文庫和基于高通量測序技術的加接頭的文庫。隨著深度測序技術的不斷發(fā)展，第二代高通量測序技術、第三代單分子測序技術已經(jīng)普遍地應用于各項研究領域中，以454測序技術和Illumina測序技術為表示的二代測序法得到迅速推廣用于構建病毒宏基因組文庫，相信將來第三代測序平臺如tSMSTM（truesinglemolecularsequeneing）技術平臺、SMRT（singlemoleculereal-time）技術平臺、FRET測序技術及納米孔單分子技術為表示的第三代測序法也將應用于構建病毒宏基因組文庫。Donaldson等[23]采用高通量測序技術構建了蝙蝠腸道的病毒宏基因組學文庫，獲得了600000條讀長（Reads）的核酸序列。DNA宏基因組測序的病原檢出率均高于培養(yǎng)等傳統(tǒng)方法，表現(xiàn)出好的診斷性能。病毒宏基因組分析檢測
宏基因組是指特定環(huán)境中全部微生物遺傳物質(zhì)的總和，宏基因組測序以特定環(huán)境中的整個微生物群落作為研究的對象，不需對微生物進行分離培養(yǎng)，而是提取環(huán)境微生物總DNA進行研究。其擺脫了傳統(tǒng)研究中微生物分離培養(yǎng)的技術限制，在基因組水平解讀微生物群體的多樣性和豐度，探索微生物與環(huán)境及宿主之間的關系。目前，第二代高通量測序技術在宏基因組的研究上已被普遍應用。第二代高通量測序平臺具有通量高、準確性高、速度快、信息全等特點，加快了宏基因組測序在鑒定低豐度的微生物群落，挖掘更多基因資源方面的應用。病毒宏基因組分析檢測宏病毒組是病毒的宏基因組，該技術是隨著高通量測序技術的興起而發(fā)展起來的。
病毒宏基因組測序中人類想要征服新發(fā)人畜共患病，只有提前發(fā)掘潛在的新的致病的病原，并針對新病原進行基因組分析、流行病學調(diào)查、疫苗和抗體的開發(fā)等方面的研究。病毒宏基因組學是在宏基因組學基礎上發(fā)展起來研究特定環(huán)境中病毒的新興技術，該技術結合深度測序技術（第二代、第三代測序技術）已經(jīng)在人類、動物、特定環(huán)境中挖掘出大量的新病毒，該技術不依賴于病毒培養(yǎng)及病毒序列，在國內(nèi)外被普遍應用于新發(fā)人畜共患病病原的挖掘與臨床診斷?？傊?，隨著病毒宏基因組學與各種新的分子生物學技術及深度測序技術的結合，該技術展現(xiàn)了區(qū)別于傳統(tǒng)病毒診斷技術的優(yōu)勢，而該技術對動物病毒的挖掘及其他領域的應用將更加普遍。
優(yōu)化臨床制備病毒宏基因組測序所用樣本的方法：①介紹高通量病毒宏基因組測序的樣本制備步驟，對臨床樣本的總核酸進行隨機擴增；②檢測了從血漿樣本中富集/擴增DNA及RNA病毒的不同方法，一種包括過濾、核酸酶消化、在不同反應中隨機擴增DNA及RNA的步驟是較好的；③隨后在包含了不同病毒科的樣本中驗證此方法，可高讀數(shù)地檢測到大多數(shù)病毒序列，且優(yōu)于現(xiàn)行的其它樣本制備方法；④該方法不只適用于血漿樣本，還可用于尿液、咽喉拭子等臨床樣本。在傳統(tǒng)的診斷檢測中對病原體的診斷檢測是通過體外培養(yǎng)的方式進行的。
病毒宏基因組學應用：病毒宏基因組學已經(jīng)應用到人類、動物和環(huán)境中，涉及到農(nóng)業(yè)、工業(yè)及畜牧業(yè)等各個領域，其應用范圍已延伸到海洋、湖水、熱泉、下水道等無機環(huán)境，以及組織病料、血液、呼吸道、動物排泄物等有機環(huán)境。應用病毒宏基因組學的方法研究佛羅里達綠海龜?shù)睦w維狀瘤組織中發(fā)現(xiàn)了單鏈DNA病毒（Seaturtletornovirus1，STTV1）。分析了來自馬里蘭淡水湖中的RNA病毒宏基因組，結果獲得淡水湖中30多個RNA病毒家族序列，其中包含小RNA病毒、小雙股病毒及正黏病毒等。通過對樣本進行宏病毒組測序，我們可以了解單個樣本里有什么病毒。深圳腸道微生物多樣性分析多少錢
宏基因組測序技術不依賴于微生物的分離培養(yǎng)。病毒宏基因組分析檢測
基因測序技術：基因測序技術在此次病情中起到了至關重要的作用，我國科研單位在一個月之內(nèi)迅速發(fā)現(xiàn)了正確的致病病毒并完成測序，得到了WHO的贊許。我國科學研究者對病毒序列、變異、核酸檢測手段的分享也為全世界應對COVID-19病情帶來了極有力的支持。在病毒檢測過程中，一種測序技術獲得了市場的普遍關注，這個技術就是宏基因組測序（mNGS）技術。宏基因組學（Metagenomics），是以特定環(huán)境樣品中整個微生物群落基因組作為研究對象，無需分離培養(yǎng)，直接提取環(huán)境樣本的DNA進行高通量測序。對于臨床而言，mNGS可以準確的分析患者樣本全部微生物，這一點對于傳染性疾病的病原體研究具有極高的應用價值。病毒宏基因組分析檢測
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