武漢隨機PCR未知病原微生物篩查技術(shù)

來源: 發(fā)布時間:2022-11-12

微生物鑒定的用途:醫(yī)療保?。簻蚀_、快速地鑒定細菌和寄生蟲,以進行正確和及時的疾病診斷,并進行適當?shù)脑\療。流行病學:為了追蹤病原體和追蹤疾病的傳播和暴發(fā),以及鑒定新的隔離物,例如耐藥隔離。制藥工業(yè):由于微生物是對無菌性的重大威脅,對環(huán)境微生物的準確鑒定通常是制藥行業(yè)良好的生產(chǎn)實踐(GMP)要求。其他用途:包括刑事調(diào)查、微生物取證和環(huán)境研究等。傳統(tǒng)的微生物鑒定方法依賴于表型鑒定,主要是用染色法、培養(yǎng)法和簡單的生化檢驗。宏觀特征包括微生物的整體外觀,其形狀、大小、顏色和氣味等,可以用肉眼看到。通過在瓊脂培養(yǎng)基檢查其形態(tài)學/宏觀特征來確定微生物的類型。同一物種在不同的培養(yǎng)基中會出現(xiàn)不同的表現(xiàn)。未知病原微生物中有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)是無法鑒別的。武漢隨機PCR未知病原微生物篩查技術(shù)

有些微生物是有益的,也有些微生物的存在可引起多種應變性疾病和傳染性疾病,會對人身體健康產(chǎn)生不良的影響;還會使食品及原料腐爛和變質(zhì)。所以,微生物檢測必須嚴格把關(guān)。微生物檢測的必要性:1、食品:食品因含有微生物可依賴生長的營養(yǎng)成分,因此食品會受到微生物不同程度的污染。食品質(zhì)量安全關(guān)系到人民**的身體健康,生命安全及社會經(jīng)濟。為了食品的安全,人們的健康,微生物檢測極其必要。2、醫(yī)院:醫(yī)院都和微生物有著極為密切的關(guān)系。加強醫(yī)院的微生物檢驗與監(jiān)測,對于預防和控制醫(yī)院起著十分重要的作用。3、空氣:室內(nèi)空氣是微生物污染的重要傳播途徑。室內(nèi)舒適的溫度,濕度等環(huán)境條件以及相對密閉的室內(nèi)更為各種有害微生物滋生創(chuàng)造了條件。只有有效地檢測微生物的含量,才能采取有效地措施,才能保證人體健康不受微生物的危害。微生物鑒定診斷可以通過顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進行判斷。

微生物檢測方法:計數(shù)器測定法即用血細胞計數(shù)器進行計數(shù)。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3),因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細菌數(shù),可計算樣品中的含菌數(shù)。本法簡便易行,可立即得出結(jié)果,不僅適于細菌計數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù)。電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。該法測定結(jié)果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。

微生物鑒定系統(tǒng)的工作原理因不同的儀器和系統(tǒng)而異。不同的細菌對底物的反應不同是生化反應鑒定細菌的基礎(chǔ),而試驗結(jié)果的準確度取決于鑒定系統(tǒng)配套培養(yǎng)基的制備方法、培養(yǎng)物濃度、孵育條件和結(jié)果判定等。大多微生物鑒定系統(tǒng)采用細菌分解底物后反應液中pH的變化,色原性或熒光原性底物的酶解,測定揮發(fā)或不揮發(fā)酸,或識別是否生長等方法來分析鑒定細菌。藥敏試驗分析系統(tǒng)的基本原理是將微量稀釋在條孔或條板中,加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育,通過測定細菌生長的濁度,或測定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強度或熒光原性物質(zhì)的水解,觀察細菌的生長情況。在含有培養(yǎng)基中,濁度的增加。對于無菌藥品生產(chǎn)來說生產(chǎn)區(qū)域的微生物種類非常有限。

傳統(tǒng)的血清學與分子生物學方法如ELISA與PCR,由于病原微生物的特異性差異,有時只能用于病原微生物特定種甚至特定種特定株系分離物的檢測;而電鏡與生物學接種鑒定方法又難以將病原微生物鑒定至物種水平。相比之下,高通量測序技術(shù)可以提供一條新的病原微生物鑒定途徑。病原微生物檢測的不可知性使得高通量測序成為研究這類病原微生物的有用工具。目前,該技術(shù)在人類與動植物病原微生物的鑒定中已經(jīng)有較多的應用。高通量測序在臨床virology領(lǐng)域的應用病毒作為一種古老的物種存在于自然界,幾乎能夠在任何物種寄生,與人類健康息息相關(guān)。雖然大部分病毒沒有出現(xiàn)明顯的臨床癥狀,少數(shù)病毒能夠引起人類多種疾病,表現(xiàn)出包括發(fā)熱、腹瀉,出血、出疹、呼吸道癥狀、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等。臨床細菌學不可缺少的基本技術(shù),是獲得純培養(yǎng)物的必要手段。微生物鑒定診斷

微生物檢測方法中的比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細菌的數(shù)量。武漢隨機PCR未知病原微生物篩查技術(shù)

實現(xiàn)病原微生物種類鑒定有哪些技術(shù)手段?病原微生物的研究歷史不算長。發(fā)展至今已經(jīng)有了成套的檢測體系。利用不同類別的微生物有其本身不同于其他微生物的特點,如從培養(yǎng)形態(tài)、顯微鏡觀測形態(tài)、生物學功能、致病性、生物化學反應、抗原抗體反應、核酸序列等方面,都可以進行相當程度的鑒別。即便如此,依然有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)無法鑒別。高通量測序技術(shù)問世,給微生物鑒別打開一扇新的大門。它對核酸進行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實現(xiàn)鑒別。武漢隨機PCR未知病原微生物篩查技術(shù)

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