成都病毒全序列測序分析方法

來源: 發(fā)布時間:2022-09-15

深度測序技術(shù)對科學(xué)研究范式相關(guān)影響:個性化醫(yī)學(xué)、P4醫(yī)學(xué)和準(zhǔn)確醫(yī)學(xué)等研究范式都是在近幾年深度測序技術(shù)迅猛發(fā)展的基礎(chǔ)上提出的。個人基因組測定的可行性,使得大眾有可能測定和分析自己的基因組、尋找到個人健康相關(guān)的基因風(fēng)險因素,從而可以在生活習(xí)慣、飲食等方面提早進(jìn)行個性化預(yù)測和預(yù)防。由于互聯(lián)網(wǎng)的發(fā)展和即時檢驗技術(shù)(point-of-care-testing,POCT)的應(yīng)用,人們可以通過網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行交流和參與到整個診療過程,這便是P4醫(yī)學(xué)的概念:預(yù)測性(predictive)、預(yù)防性(preventive)、個性化(personalized)及參與性(participatory)。全基因組測序通過運(yùn)用新一代高通量DNA測序儀,進(jìn)行10到20倍覆蓋率的個人全基因組測序。成都病毒全序列測序分析方法

病毒全基因組測序注意事項:病毒全基因組測序,測序覆蓋度,基因組被測序得到的堿基覆蓋的比例;測序覆蓋度是反映測序隨機(jī)性的指標(biāo)之一;測序序深度與覆蓋度之間的關(guān)系可以過Lander-WatermanModel(1988)來確定。當(dāng)深度達(dá)到5X時,則可覆蓋基因組的約99.4%以上。通過生物信息手段,分析不同個體基因組間的結(jié)構(gòu)差異,同時完成SNP及基因組結(jié)構(gòu)注釋。DNA突變可誘發(fā)病癥。吸煙過程中所釋放的>60種致病化學(xué)物質(zhì)可與DNA結(jié)合并對DNA鏈上的鳥嘌呤和腺嘌呤進(jìn)行化學(xué)修飾從而產(chǎn)生大的加合物,該加合物改變了DNA雙螺旋的結(jié)構(gòu),如果不被核苷酸剪切修復(fù)或其他的途徑進(jìn)行糾正,那么DNA在復(fù)制時就會按照non-Watson-Crick方式進(jìn)行復(fù)制并阻止RNA聚合酶進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。成都病毒全序列測序分析方法目前對病毒溯源分型主要檢測手段就是高通量測序技術(shù)。

能實現(xiàn)對病毒的全基因組進(jìn)行測序的技術(shù)手段:早期在高通量測序技術(shù)普及之前,對病毒的全基因組進(jìn)行測序是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長,但與此同時,擴(kuò)增和克隆工作費時費力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對于大量基因組的測序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對于研究者一直是一個困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實驗和分析流程用于對病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評。

全基因組測序要注意的事項:全基因組測序是對未知基因組序列的物種進(jìn)行個體的基因組測序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對插入片段進(jìn)行測序。然后對測得的序列組裝成Contig,通過Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度(Sequencingdepth)是指測序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評價測序量的指標(biāo)之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個正相關(guān)的關(guān)系,測序帶來的錯誤率或假陽性結(jié)果會隨著測序深度的提升而下降。測序的個體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測序深度在50X~100X以上時,基因組覆蓋度和測序錯誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。DNA病毒基因組測序:獲得一種指定DNA病毒盡量完整的序列。

對病毒的全基因組進(jìn)行測序價格合理:上海探普生物科技有限公司致力于醫(yī)藥、保養(yǎng),以科技創(chuàng)新實現(xiàn)管理的追求。探普生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供病毒測序,病毒全基因組測序,病毒宏基因組測序,未知病原鑒定。探普生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。探普生物始終關(guān)注醫(yī)藥、保養(yǎng)市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。病毒全基因組測序具有的特點:采用高通量測序儀,全流程質(zhì)控。病毒全序列測序診斷

病毒全基因組測序具有的特點:獨有的一定定量技術(shù),實現(xiàn)病原定量分析。成都病毒全序列測序分析方法

有哪些技術(shù)手段能實現(xiàn)對病毒的全基因組進(jìn)行測序?早期在高通量測序技術(shù)普及之前,對病毒的全基因組進(jìn)行測序是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長,但與此同時,擴(kuò)增和克隆工作費時費力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對于大量基因組的測序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對于研究者一直是一個困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實驗和分析流程用于對病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評。成都病毒全序列測序分析方法

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