高通量測序技術(shù)又稱“下一代“測序技術(shù)或深度測序技術(shù)，可以一次性對(duì)幾十萬至幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定。現(xiàn)已普遍應(yīng)用在基因組測序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。高通量測序技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)測序一次性的改變，一次對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定，因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測序技術(shù)(nextgenerationsequencing)足見其劃時(shí)代的改變，同時(shí)高通量測序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌的分析成為可能，所以又被稱為深度測序(deepsequencing)。對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測序，是利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因組序列。四川病毒全基因組測序診斷
需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序的應(yīng)用場景：在探普生物長時(shí)間運(yùn)行過程中，我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。先，從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個(gè)關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi)，同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外，有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組，可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。DNA病毒全基因組測序分析服務(wù)公司分析不同大小和不同樣品類型的UViGs對(duì)于探索病毒基因組序列空白是有價(jià)值的。
對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序的價(jià)格合理，樣品具備什么條件才可以獲得比較質(zhì)量的組裝效果？其他公司對(duì)用于測序的樣本的要求較高。探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序是基于探普的專有流程，樣本要求非常低，不要求粒子純化，不要求總量到達(dá)微克，按探普的專門的收樣標(biāo)準(zhǔn)和送樣流程進(jìn)行即可。簡言之，經(jīng)過細(xì)胞或其他方式培養(yǎng)的樣本，若載量較高，不需要復(fù)雜處理，直接破碎細(xì)胞取上清提取核酸都可以獲得非常好的組裝效果；而臨床標(biāo)本，需要看情況，對(duì)于被侵害嚴(yán)重的個(gè)體，釋放較高的部位也可以獲得很好的效果；其他類型的樣本，就需要測ct值來確定是否可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以及評(píng)估測序效果。
二代測序可以用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序有哪些挑戰(zhàn)？二代測序相較sanger測序，差異主要就是單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量，因此也稱為高通量測序。想要通過高通量測序獲得病毒全序列，需要經(jīng)歷：核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。而高通量測序技術(shù)本身并不是以病毒為目標(biāo)開發(fā)的，因此每個(gè)環(huán)節(jié)都是挑戰(zhàn)。核酸純化步驟決定了Input核酸的起始濃度和總量，從而決定了文庫構(gòu)建的成敗、質(zhì)量和產(chǎn)量；文庫的好壞決定了數(shù)據(jù)的質(zhì)量和產(chǎn)出；而數(shù)據(jù)的質(zhì)量產(chǎn)出直接影響分析結(jié)果。樣品一般核酸濃度很低，且?guī)в写罅克拗魑廴?，因此?shí)驗(yàn)部分和分析部分都比較困難。探普生物基于這些困難點(diǎn)，進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測試，開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序，該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。病毒全基因組測序具有的特點(diǎn)：無需培養(yǎng)和特異性擴(kuò)增，對(duì)采集臨床樣本直接檢測。
病毒（Virus）由一種核酸分子（DNA或RNA）與蛋白質(zhì)（Protein）構(gòu)成或由蛋白質(zhì)構(gòu)成（如朊病毒）。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成，可分為單鏈DNA病毒（ssDNA）、雙鏈DNA病毒（dsDNA）、單鏈RNA病毒（ssRNA）、雙鏈RNA病毒（dsRNA）和蛋白質(zhì)病毒（如朊病毒）。根據(jù)宿主類型的不同，可以分為噬菌體（細(xì)菌病毒）、植物病毒（煙花葉病毒）和動(dòng)物病毒（如禽流感病毒、天花病毒和HIV等）。病毒全基因組測序（VirusWholeGenomeSequencing，VWGS），是指基于第二代高通量測序技術(shù)，對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因組序列，解析編碼信息，并獲得相應(yīng)的變異信息。測序覆蓋度是反映測序隨機(jī)性的指標(biāo)之一。杭州全基因組測序分析原理
測序覆蓋度是反映測序隨機(jī)性的指標(biāo)之一。四川病毒全基因組測序診斷
目前對(duì)我國首例輸入性裂谷熱病例病毒進(jìn)行全基因組測定,分析其進(jìn)化來源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測序儀進(jìn)行病毒全基因組測定.對(duì)獲得的基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接、比對(duì)、進(jìn)化樹構(gòu)建和關(guān)鍵位點(diǎn)分析.結(jié)果通過測定獲得了病毒全基因組11979nt,該測定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(＞98％)。病毒Gn蛋白C端信號(hào)肽區(qū)存在1個(gè)氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。四川病毒全基因組測序診斷
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