高通量測序突變分析方法

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-07

深度測序技術(shù)稱為深度測序(deepsequencing),是因?yàn)樗菍?duì)傳統(tǒng)測序技術(shù)的一次性改變,它通過一次性對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定(之前只是幾十至多幾千個(gè)堿基),同時(shí),如此的高通量測序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全方面的分析成為可能。你以為深度測序只是一種“養(yǎng)”在實(shí)驗(yàn)室“深閨”中摸不著、看不透的高精尖技術(shù)?錯(cuò)!錯(cuò)!錯(cuò)!深度測序技術(shù)的巨大發(fā)展,與計(jì)算機(jī)的發(fā)展歷程有著類似之處,它將對(duì)人類的科學(xué)、經(jīng)濟(jì)和社會(huì)三個(gè)方面產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。病毒是由一種核酸分子與蛋白質(zhì)構(gòu)成或只由蛋白質(zhì)構(gòu)成。高通量測序突變分析方法

有哪些技術(shù)手段能實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序?早期在高通量測序技術(shù)普及之前,對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長,但與此同時(shí),擴(kuò)增和克隆工作費(fèi)時(shí)費(fèi)力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對(duì)于大量基因組的測序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對(duì)于研究者一直是一個(gè)困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。高通量測序突變分析方法在探普生物長時(shí)間運(yùn)行過程中,接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。

深度測序技術(shù)之所以稱為深度測序(deepsequencing),是因?yàn)樗菍?duì)傳統(tǒng)測序技術(shù)的一次性改變,它通過一次性對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定(之前只是幾十至多幾千個(gè)堿基),同時(shí),如此的高通量測序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全方面的分析成為可能。你以為深度測序只是一種“養(yǎng)”在實(shí)驗(yàn)室“深閨”中摸不著、看不透的高精尖技術(shù)?錯(cuò)!錯(cuò)!錯(cuò)!深度測序技術(shù)的巨大發(fā)展,與計(jì)算機(jī)的發(fā)展歷程有著類似之處,它將對(duì)人類的科學(xué)、經(jīng)濟(jì)和社會(huì)三個(gè)方面產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。

二代測序可以用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序有哪些挑戰(zhàn)?二代測序相較sanger測序,差異主要就是單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量,因此也稱為高通量測序。想要通過高通量測序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。而高通量測序技術(shù)本身并不是以病毒為目標(biāo)開發(fā)的,因此每個(gè)環(huán)節(jié)都是挑戰(zhàn)。核酸純化步驟決定了Input核酸的起始濃度和總量,從而決定了文庫構(gòu)建的成敗、質(zhì)量和產(chǎn)量;文庫的好壞決定了數(shù)據(jù)的質(zhì)量和產(chǎn)出;而數(shù)據(jù)的質(zhì)量產(chǎn)出直接影響分析結(jié)果。樣品一般核酸濃度很低,且?guī)в写罅克拗魑廴?,因此?shí)驗(yàn)部分和分析部分都比較困難。探普生物基于這些困難點(diǎn),進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):無需培養(yǎng)和特異性擴(kuò)增,對(duì)采集臨床樣本直接檢測。

病毒全基因組測序定:上海探普生物科技有限公司的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序有什么優(yōu)勢?全國開設(shè)病毒相關(guān)測序的公司不超過5家,只有探普生物是專門為病毒研究者服務(wù)的,探普生物的研發(fā)團(tuán)隊(duì)和實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)都來自全國各地病毒學(xué)、微生物學(xué)專業(yè)的高校,碩士及以上學(xué)歷成員超過60%,團(tuán)隊(duì)具備普通測序?qū)嶒?yàn)和分析基礎(chǔ)之外,同時(shí)具備病毒學(xué)及微生物學(xué)的學(xué)術(shù)背景,相當(dāng)了解病毒相關(guān)樣本情況、研究方向等。研究者在項(xiàng)目咨詢的時(shí)候就可以明顯感覺到探普生物的專業(yè)性,溝通順暢,省時(shí)省力。通過對(duì)病毒全基因組高通量測序可以在較短時(shí)間內(nèi)獲取病毒的全部基因信息,解釋病毒的來源。RNA病毒全基因組二代測序分析技術(shù)

二代測序可以用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序有哪些挑戰(zhàn)?高通量測序突變分析方法

RNA病毒基因組測序:動(dòng)物、人、植物被特定病毒株侵染、分離到病毒株、連續(xù)傳代的病毒株往往都需要獲得盡量完整的基因組序列來指導(dǎo)下一步的研究,傳統(tǒng)的sanger測序需要了解序列、設(shè)計(jì)引物、做很多PCR,往往效率很低,而NGS作為一種無需特異性引物擴(kuò)增的測序方式,可以直接從RNA中獲得序列。如果,1,您的目的是:獲得一種指定RNA病毒盡量完整的序列;2,您可以提供該病毒的中英文名稱;3,您了解樣本中病毒的載量情況、培養(yǎng)狀況、ct值等任一信息。那么,RNA病毒基因組測序可以幫助你,探普為你準(zhǔn)備了完整的下單、樣本準(zhǔn)備方法。高通量測序突變分析方法