高通量測序方法

來源: 發(fā)布時間:2022-02-20

高通量基因組測序中,測序深度和覆蓋度指的是:測序深度是指測序得到的總堿基數(shù)與待測基因組大小的比值。假設(shè)一個基因大小為2M,測序深度為10X,那么獲得的總數(shù)據(jù)量為20M。覆蓋度是指測序獲得的序列占整個基因組的比例。由于基因組中的高GC、重復(fù)序列等復(fù)雜結(jié)構(gòu)的存在,測序終拼接組裝獲得的序列往往無法覆蓋有所的區(qū)域,這部分沒有獲得的區(qū)域就稱為。例如一個細菌基因組測序,覆蓋度是98%,那么還有2%的序列區(qū)域是沒有通過測序獲得的。深度測序技術(shù)促進了基因檢測的普及。高通量測序方法

發(fā)現(xiàn)病例的要盡快對病毒進行全基因組測序的原因是:通過對病毒全基因組高通量測序可以在較短時間內(nèi)獲取病毒的全部基因信息,解釋病毒的來源、傳播、變異演化等科學(xué)問題,為后續(xù)流行病學(xué)調(diào)查指明方向,為相關(guān)病例的追蹤溯源提供重要依據(jù),目前對病毒溯源分型主要檢測手段就是高通量測序技術(shù)。高通量測序技術(shù)如何進行病毒溯源?先對獲得的早期病例標(biāo)本開展病毒全基因組高通量序列測定,通過與本地流行病毒及全球其他地區(qū)測定過序列的病毒比較,如果該病例傳染的病毒在基因組上和北美流行株更接近,比如在全長接近3萬個堿基的序列上,兩者只相差幾個堿基,相似度為99%以上,這就是為我們推斷該病例攜帶病毒為北美流行株提供依據(jù)。高通量測序方法病毒全基因組測序產(chǎn)品特點:病原診斷更準(zhǔn)確。

全基因組測序相關(guān)知識:全基因組測序是對未知基因組序列的物種進行個體的基因組測序。全基因組預(yù)測的意義揭示了人類生、老、病和死的奧秘,使人類從根本上認(rèn)知疾病發(fā)生的原因,做到正確的調(diào)整疾病和盡早的預(yù)防疾病。每個人從開始就繼承了父母的DNA遺傳信息,并且攜帶一生,不易改變。全基因組測序通過運用新一代高通量DNA測序儀,進行10到20倍覆蓋率的個人全基因組測序,然后與人類基因組精確圖譜比較,得到完整的個人全基因組序列,破譯個人全部的遺傳信息的過程。全基因組測序覆蓋面廣,能檢測個體基因組中的全部遺傳信息,準(zhǔn)確性高。

深度測序數(shù)據(jù):目前深度測序數(shù)據(jù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域數(shù)量增加快、應(yīng)用廣的數(shù)據(jù),對這些數(shù)據(jù)的管理、分析和應(yīng)用給生物信息學(xué)帶來了巨大的挑戰(zhàn)。早期的測序技術(shù)是“測定沒有計算快”,下一代測序技術(shù)發(fā)展以來,變?yōu)槿缃竦摹坝嬎銢]有測定快”。深度測序數(shù)據(jù)的迅猛增長使得數(shù)據(jù)科學(xué)分析方面的人才十分缺乏,深度測序和大數(shù)據(jù)處理都是新生事物,將深度測序數(shù)據(jù)應(yīng)用到臨床更需要數(shù)學(xué)統(tǒng)計、計算機和生物、臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的多學(xué)科交叉的高級人才。測序深度是測序量除以基因組長度,例如測序深度10*就相當(dāng)于測了10次的全基因組。二代測序可以用于對病毒的全基因組進行測序有哪些挑戰(zhàn)?

對病毒進行全基因組測序:在探普生物長時間運行過程中,我們接觸到的對病毒的全基因組進行測序項目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費,同時能達到研究目的。此外,有的單位需要對傳染病的病原進行流行病學(xué)監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對病毒的全基因組進行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達到研究或者監(jiān)測疫病的目的。想要通過高通量測序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。河北病毒測序進化分析服務(wù)

高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)測序一次**性的改變。高通量測序方法

新一代測序中基因從頭測序和重測序有什么區(qū)別?我要做乙肝病毒DNA全長測序,應(yīng)該選用哪種方法?1、條件不同;從頭測序的條件是不依賴于任何物種基因組;重測序的條件是在已知物種基因組的情況下進行的。2、病毒變異率不同;從頭測序是通過拼接和組裝的方式獲得基因組序列圖譜,病毒變異率很低;重測序可以尋找出大量的單核苷酸多態(tài)性位點,插入缺失位點,結(jié)構(gòu)變異位點,拷貝數(shù)變異等變異信息,從而獲得生物群體的遺傳特征。病毒變異率很高。乙肝病毒在醫(yī)學(xué)上已經(jīng)測過,只需要做重測序就可以。高通量測序方法

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