能實現(xiàn)對病毒的全基因組進行測序的技術(shù)手段：早期在高通量測序技術(shù)普及之前，對病毒的全基因組進行測序是通過非特異性擴增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當物種有了參考的序列之后，可以通過特異性擴增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準確度高，讀長很長，但與此同時，擴增和克隆工作費時費力，由于流程繁瑣，加上快速變異導致引物無法通用，該方法對于大量基因組的測序工作而言，可操作性不強，這對于研究者一直是一個困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標準濃度和體積后進行測序和分析，減少了工作量，增加了成功率。探普生物進行了大量有針對性的研發(fā)和測試，開發(fā)了全套的實驗和分析流程用于對病毒的全基因組進行測序，該流程自運行以來廣受研究者們好評。測序覆蓋度是反映測序隨機性的指標之一。國內(nèi)深度測序分析原理
深度測序技術(shù)對科學研究范式相關(guān)影響：個性化醫(yī)學、P4醫(yī)學和準確醫(yī)學等研究范式都是在近幾年深度測序技術(shù)迅猛發(fā)展的基礎(chǔ)上提出的。個人基因組測定的可行性，使得大眾有可能測定和分析自己的基因組、尋找到個人健康相關(guān)的基因風險因素，從而可以在生活習慣、飲食等方面提早進行個性化預(yù)測和預(yù)防。由于互聯(lián)網(wǎng)的發(fā)展和即時檢驗技術(shù)（point-of-care-testing，POCT）的應(yīng)用，人們可以通過網(wǎng)絡(luò)進行交流和參與到整個診療過程，這便是P4醫(yī)學的概念：預(yù)測性（predictive）、預(yù)防性（preventive）、個性化（personalized）及參與性（participatory）。安徽病毒高通量測序進化分析多少錢病毒株都需要獲得盡量完整的基因組序列來指導下一步的研究。
對病毒進行全基因組測序：在探普生物長時間運行過程中，我們接觸到的對病毒的全基因組進行測序項目有比較豐富的應(yīng)用場景。先，從事基因進化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費，同時能達到研究目的。此外，有的單位需要對傳染病的病原進行流行病學監(jiān)測和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組，可能需要對病毒的全基因組進行測序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達到研究或者監(jiān)測疫病的目的。
對病毒的全基因組進行測序：對病毒的全基因組進行測序主要是通過非特異性擴增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當物種有了參考的序列之后，可以通過特異性擴增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準確度高，讀長很長，但與此同時，擴增和克隆工作費時費力，由于流程繁瑣，加上快速變異導致引物無法通用，該方法對于大量基因組的測序工作而言，可操作性不強，這對于研究者一直是一個困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標準濃度和體積后進行測序和分析，減少了工作量，增加了成功率。探普生物進行了大量有針對性的研發(fā)和測試，開發(fā)了全套的實驗和分析流程用于對病毒的全基因組進行測序，該流程自運行以來廣受研究者們好評。對病毒的全基因組進行測序主要是通過非特異性擴增+克隆結(jié)合sanger測序來完成。
發(fā)現(xiàn)病例的要盡快對病毒進行全基因組測序的原因是：通過對病毒全基因組高通量測序可以在較短時間內(nèi)獲取病毒的全部基因信息，解釋病毒的來源、傳播、變異演化等科學問題，為后續(xù)流行病學調(diào)查指明方向，為相關(guān)病例的追蹤溯源提供重要依據(jù)，目前對病毒溯源分型主要檢測手段就是高通量測序技術(shù)。高通量測序技術(shù)如何進行病毒溯源？先對獲得的早期病例標本開展病毒全基因組高通量序列測定，通過與本地流行病毒及全球其他地區(qū)測定過序列的病毒比較，如果該病例傳染的病毒在基因組上和北美流行株更接近，比如在全長接近3萬個堿基的序列上，兩者只相差幾個堿基，相似度為99%以上，這就是為我們推斷該病例攜帶病毒為北美流行株提供依據(jù)。病毒全基因組測序是針對疑難報告，由**進行深度解析。病毒全序列測序進化分析診斷
二代測序相較sanger測序，差異主要就是單次運行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量。國內(nèi)深度測序分析原理
全基因組測序要注意的事項：全基因組測序是對未知基因組序列的物種進行個體的基因組測序。技術(shù)路線：提取基因組DNA，然后隨機打斷，電泳回收所需長度的DNA的片段（0.2~5Kb），加上接頭,進行DNA簇（Cluster）制備，后利用Paired-End（Solexa）或者Mate-Pair（SOLiD）的方法對插入片段進行測序。然后對測得的序列組裝成Contig，通過Paired-End的距離可進一步組裝成Scaffold，進而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有：SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度（Sequencingdepth）是指測序得到的堿基總量（bp）與基因組大小的比值，它是評價測序量的指標之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個正相關(guān)的關(guān)系，測序帶來的錯誤率或假陽性結(jié)果會隨著測序深度的提升而下降。測序的個體，如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案，當測序深度在50X~100X以上時，基因組覆蓋度和測序錯誤率控制均得以保證，后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準確。國內(nèi)深度測序分析原理
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