廣州雙螺旋直銷華南地區(qū)CyFlow系列倍性分析儀細胞周期檢測

來源：發(fā)布時間：2023-03-27

【W(wǎng)hat】

C值是指物種單倍體或配子所含的DNA量，單位為pg(picogram)或Mb(millionbasepair),而1pg相當于978Mb。

【W(wǎng)hy】

對于C值檢測的意義：

1、與微衛(wèi)星的擴增效率相關;

2、作為細胞核大小、花粉粒直徑等表型的預示值,基因組大小與細胞核大小、花粉直徑等表型性狀成正相關;

3、作為生態(tài)與環(huán)境的預示值,C值與植物的生活史、地理分布、物候期、單位面積生物量、對生長環(huán)境的敏感度(如溫度和濕度的變化)等緊密相關，還能預測長期的變化(諸如全球變暖)所引起的植被改變;

4、利用推斷的C值來揭示古生物學的趨勢，例如,根據(jù)化石細胞的大小，可以推斷化石的DNA含量。在植物化石中，氣孔保衛(wèi)細胞的大小也可以用來估計DNA含量，進而尋求C值的進化趨勢;

5、C值對物種保育具有重要的意義，大基因組的物種往往存在更大的滅絕風險。

【How】

關于基因組大小實驗說明

1、基因組大小的計算必須有一個適合的內(nèi)參，因為外參對于樣本的精確檢測提供了過于大的樣本變化。

2、參照物植物的基因組大小應該在待測樣本的0.7到2.5倍范圍內(nèi)，否則樣本的的線性不準確度會增加，并且要使用低中高三個范圍的參照物。

3、樣本基因組大小=待測樣本的峰值/參照物的峰值*參照物基因組大小(pg/Mb)

流式細胞儀檢測基因組大小的步驟

1、各取50mg內(nèi)參和待測植物組織，放入培養(yǎng)皿中

2、加入500ul核裂解液

3、使用鋒利刀片切碎組織，約30—60s

4、室溫條件下孵育2—15min

5、使用CellTrics®過濾器過濾樣本

6、加入含有RNA酶的PI染色液，根據(jù)樣本的不同，室溫避光孵育30—60min

7、使用有488nm或者532nm激光光源的流式細胞儀檢測;

8、計算基因組大小，流式結果如下：

公式：樣本基因組大小=135.48/98.29*參照物基因組大小(pg)

注意事項：

1、處理易褐變的材料時，即植物組織含較單寧類、多酚類次級代謝產(chǎn)物，可在染色過程中增加0.5-2%(p/v)PVP-10/20和/或0.01%(p/v)的檸檬酸，pH調(diào)節(jié)到4.5;

2、可使用其他低水平次級代謝產(chǎn)物的組織(葉柄,、花部、種子等缺乏活力的組織)

常用試劑盒：

可供檢測機型：