南京呼吸疾病動物模型建模

    本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地，該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測方面的研究，比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔，模擬腰椎間盤突出后突出物對神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機械壓迫癥狀，有益效果有：1.應(yīng)用機械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤突出病理，癥狀的病因?qū)W與臨床情況接近；2.相關(guān)的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀，且易于客觀測量；3.制備方法簡單，對動物損傷小，穩(wěn)定性好，成功率高；4.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不受磁場干擾，無在磁場作用下移位風險，有利于后續(xù)對動物進行磁療，經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查；5.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不影響磁場，不會對***儀器和核磁共振等儀器產(chǎn)生不良影響；6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件，使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制，豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測，為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步說明，以充分說明本發(fā)明的目的、技術(shù)特征和技術(shù)效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。動物模型作為人類疾病的縮影。南京呼吸疾病動物模型建模

    實驗期間每天進行陰道涂片，觀測動情周期變化。進一步地，檢測***水平是指：檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地，檢測對比卵巢重量是指：比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進一步地，陰道涂片是指：采用陰道脫落細胞涂片法，使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準。附圖說明圖1：e2水平檢測結(jié)果示意圖。圖2：fsh水平檢測結(jié)果示意圖。圖3：lh水平檢測結(jié)果示意圖。圖4：大鼠體重檢測結(jié)果示意圖。圖5：大鼠卵巢重量統(tǒng)計示意圖。圖6：動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：動情前期，動情期，動情后期，動情間期。圖7：he染色觀察不同方法造模對卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：空白組，2mg組，4mg組，6mg組。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。連云港生殖疾病動物模型建模模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用，容易復制，實驗中便于操作和采集各種標本。

人乳腺*裸鼠模型：1、實驗方法：**細胞移植法、**組織塊移植法。a.**細胞移植：**細胞在二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)至足夠數(shù)量。取對數(shù)生長期的**細胞，用0.25％胰酶消化，用不完全培養(yǎng)液配成濃度不低于1×107個/mL的細胞懸液，于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細胞懸液，注意每次注射前需混勻細胞懸液。b.**組織塊移植：**接種于動物長至1cm時，取新鮮的**組織塊，在不完全培養(yǎng)液中漂洗，切取生長良好、魚肉裝的瘤組織，將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動物接種部位消毒，剪一小口，將小**塊經(jīng)這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊，如切口較大需要縫合切口。

1、動物模型名稱：橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：5周 5、實驗動物體重：150g-180g6、實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：橄欖油聯(lián)合酒精誘導。按0.3mL/100g體重，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，***注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準：門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加，差異有統(tǒng)計學意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。

    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡，平均體重20g)，46h后注射hcg，與雄性小鼠合籠交配，次日取受精卵進行顯微注射，將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi)，產(chǎn)出小鼠，即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl，cas9蛋白購自newenglandbiolabs，貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr擴增產(chǎn)物測序，鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應(yīng)的擴增產(chǎn)物大小為，primers2對應(yīng)的擴增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。收集研究疾病的生物學信息資料。金山區(qū)面癱疾病動物模型建模

小鼠是人類疾病理想的動物模型不僅因為小鼠在生理上與人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。南京呼吸疾病動物模型建模

    pcrmix：反應(yīng)條件：pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示，從圖3中可以看出，6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng)，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物，而野生型沒有。pcr體系：反應(yīng)條件：(2)f1代小鼠測序：通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型，如圖4所示，為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子，切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下：步驟a、提取f1代小鼠尾部dna；步驟b、制備探針，通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。南京呼吸疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司主營品牌有東寰生物，發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大，該公司服務(wù)型的公司。是一家有限責任公司企業(yè)，隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求，與多家企業(yè)合作研究，在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進，追求新型，在強化內(nèi)部管理，完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時，良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務(wù)，在業(yè)界受到寬泛好評。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠滿意為標準；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標，提供***的原代細胞，細胞增殖與凋亡，細胞檢測試劑盒，動物疾病模型。上海東寰生物自成立以來，一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。