鎮(zhèn)江成瘤疾病動物模型建模

人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現的動物，動物疾病模型廣泛應用于疾病機制研究、新藥靶點發(fā)現及篩選、藥效評價、轉化醫(yī)學等醫(yī)學前沿領域。動物模型的優(yōu)越性主要表現在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進行實驗所帶來的風險(二)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來(三)可以克服人類某些疾病潛伏期長，病程長和發(fā)病率低的缺點(四)可以嚴格控制實驗條件，增強實驗材料的可比性(五)可以簡化實驗操作和樣品收集(六)有助于更***地認識疾病的本質可根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。鎮(zhèn)江成瘤疾病動物模型建模

    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠，圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖，小鼠出生后20天進行pcr鑒定，若有陽性小鼠出生，則表示轉基因已經整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定：(a)dna的提?。悍椒?：采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2～5mm)，放入離心管中，加入180μlbuffergl，20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇，充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上，將步驟d得到的樣品加到吸附柱里，12000rpm離心2min，棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa，12000rpm離心1min，棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb，12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意：bufferwb需要與100％乙醇預混，沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復步驟g一次。嘉定區(qū)疾病動物模型建模供應商可以簡化實驗操作和樣品收集。

1、動物模型名稱：橄欖油聯合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：5周 5、實驗動物體重：150g-180g6、實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：橄欖油聯合酒精誘導。按0.3mL/100g體重，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，***注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準：門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加，差異有統(tǒng)計學意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。

    可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無特別說明，均為現有技術中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法，檢測方法等，若無特別說明，均為現有技術中已有的常規(guī)實驗方法，檢測方法等。實施例1：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號：aa1a8029a)中，配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號：aa1a8029a)中，配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號：aa1a8029a)中，配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號：aa1a8029a)中。早期階段科學假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構建及其實驗室研究。

    pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特異性組織或細胞中。其中pirb-cwt小鼠表達cre，但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表達cre并分別含有一個或者兩個loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對引物，用pcr來驗證：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的樣本不夠純，或者pcr的延伸時間不夠長，可能擴增不出來1180bp的產物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學院pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。上海東寰告訴您如何選擇好的動物模型。寶山區(qū)泌尿疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱：固定制動致制動應激大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：成年5、實驗動物體重：180~220g6、實驗動物環(huán)境：SPF級 。1、實驗方法：采用固定制動方法。大鼠每天固定5~6小時進行制動應激，連續(xù)制動40天。2、檢測標準：模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢；曠場試驗的結果顯示，造模結束時與正常對照組比較，模型組大鼠的水平穿越格數、垂直運動次數、理毛時間均減少，**格停留時間、糞便粒數均增加；ELISA的結果顯示，造模結束時與正常對照組比較，模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。鎮(zhèn)江成瘤疾病動物模型建模

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