纖維化疾病動物模型建模說明書

動物模型名稱：橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：5周5、實驗動物體重：150g-180g6、實驗動物環(huán)境：SPF級1、實驗方法：橄欖油聯(lián)合酒精誘導。按0.3mL/100g體重，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，***注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準：門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加，差異有統(tǒng)計學意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。上海東寰告訴您如何選擇好的動物模型。纖維化疾病動物模型建模說明書

特發(fā)性肺纖維化模型小鼠(右)相對于對照組小鼠肺部組織MASSON染色對比（4周）5.急性肺損傷模型急性肺損傷(acutelunginjury，ALI)是各種直接和間接致傷因素導致的肺泡上皮細胞及內(nèi)皮細胞損傷，造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫，導致的急性低氧性呼吸功能不全。以肺容積減少、肺順應性降低、通氣/血流比例失調(diào)為病理生理特征，臨床上表現(xiàn)為進行性低氧血癥和呼吸窘迫，肺部影像學上表現(xiàn)為非均一性的滲出變，其發(fā)展至嚴重階段（氧合指數(shù)<200）被稱為急性呼吸窘迫綜合征（acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS）。5.1急性肺損傷大鼠模型建立淮安心血管疾病疾病動物模型建模可以簡化實驗操作和樣品收集。

急性肺損傷模型大鼠(右)與對照組大鼠肺部照片對比5.2.2肺的濕/干重比檢測：肺的濕/干重比是反應肺水腫的直接指標，也是反應肺損傷嚴重程度的敏感指標。在急性肺損傷發(fā)生后，大量液體滲出至肺泡和肺間質(zhì)，導致肺的重量增大，而肺的干重則不受影響。處死大鼠、剪斷氣管后取全肺，稱濕重，然后將肺置于65℃恒溫箱中干燥，24h后取出稱干重，計算肺濕/干重比值。圖7.急性肺損傷模型大鼠(ALI)與對照組大鼠肺干濕重比隨不同時間點的變化。5.2.3肺泡盥洗液（BALF）中細胞計數(shù)：小鼠取血后，開胸，分離縱膈，注射器抽取3ml生理鹽水從氣管插管推入肺中，每次反復灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃3000r/min離心15min，取上清，保存于-80度用于后續(xù)檢測。

    大到動物死亡原因分析，小到灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結(jié)出每天實驗的優(yōu)缺點。做任何一個操作之前，建議提前腦海中反復模擬，準備好相關(guān)工具和試劑，避免臨用之際缺少藥的，影響實驗操作節(jié)奏和個人心情。筆者曾經(jīng)灌胃操作的時候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了，只好重新回實驗室準備，那真叫一個郁悶。仔細記錄每日實驗過程無論是碩士還是博士，導師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關(guān)的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規(guī)劃首先，個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的，高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項的格式逐條列出，哪一個時間段需要做什么事情？這樣的好處有兩點，一個是自己提前把時間預約好，可以留出足夠的時間休息和娛樂；另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感，辦事起來往往更高效且不會遺漏?？傊?，預實驗就是迷你版正式實驗，希望小伙伴們在進行預實驗的時候一定要盡可能地準備周全，這樣才能快的推進正式實驗。歡迎致電咨詢疾病動物模型建模。

隨著大氣污染、吸煙、工業(yè)經(jīng)濟發(fā)展導致的理化因子增多以及人口年齡老化等因素，呼吸系統(tǒng)疾病近年來有明顯增長的趨勢。由于呼吸疾病涉及的較多，包括氣管、支氣管及肺部等，單以肺部為例，所涉疾病就包括肺阻塞、肺纖維化、肺氣腫、等，下面，武漢云克隆將以大鼠/小鼠為模式動物，介紹幾種常見的肺部疾病動物模型。4.特發(fā)性肺纖維化特發(fā)性肺纖維化（Idiopathicpulmonaryfibrosis，IPF）為不明原因引起的成人慢性、進展性、纖維化性間質(zhì)性肺炎。4.1建模方法:SPF級C57/BL6雌性小鼠，體重約18~20g。使用氣管滴注博來霉素法建模。避免了在人身上進行實驗所帶來的風險。心血管疾病疾病動物模型建模說明書

動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選。纖維化疾病動物模型建模說明書

pirb在軸突生長錐表達，位于富含肌動蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中，在神經(jīng)元突起的表達呈點狀分布。文獻表明，pirb表達隨年齡增加，特別是在老齡認知損傷的小鼠海馬中，pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對海馬長時程增強的破壞作用需要pirb的參與，在ad轉(zhuǎn)基因模型中，pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失，而且介導幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們，pirb參與突觸可塑性，抑制pirb可能對ad起到***效應。但是在cns，pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題，我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點，為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。纖維化疾病動物模型建模說明書