松江區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-25

1、動物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周 5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標準:門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。松江區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模

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    可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實驗方法,檢測方法等。實施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中。宿遷品質(zhì)好的疾病動物模型建模模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用,容易復(fù)制,實驗中便于操作和采集各種標本。

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    PMID:15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動物模型1.糖尿病***1)模型構(gòu)建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2)模型檢測指標(PMID:29107826、28345659)3)生化指標檢測4)超聲檢測5)主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1)誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建(PMID:29732743)實驗動物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,現(xiàn)配現(xiàn)用),并給予高脂飼料進行喂養(yǎng)。①模型檢測指標血糖檢測②HE染色③超聲心電圖2)自發(fā)性1型DCM模型3)自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1)模型構(gòu)建PMID:30862093實驗動物:小鼠方法:糖尿病雄性db/db(+/+Leprdb/J)小鼠。喂養(yǎng)至21周2)模型檢測指標①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散,細胞排列紊亂GCL,神經(jīng)節(jié)細胞層;INL,內(nèi)核層;ONL,外核層三、動物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時,需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢,即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時需考慮是否與體重、基因表達等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適,簡便。

1、動物模型名稱:角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:1.8~2.5kg6、實驗動物環(huán)境:SPF級。1、實驗方法:角膜環(huán)鉆致兔角膜機械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒,以保持結(jié)膜清潔。開瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切,并滴入2滴氯霉素眼藥水潤洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮,術(shù)畢,滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。這類動物疾病模型是指各種疾病共同性的一些病理變化過程的模型。

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    具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進行驗證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻。黃浦區(qū)提供疾病動物模型建模

必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。松江區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模

1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測外周血紅細胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測標準:模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構(gòu)建了失血性貧血動物模型造模。松江區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模

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