河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-26

細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開(kāi)發(fā)階段常用來(lái)評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的控制作用。經(jīng)過(guò)之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè),此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長(zhǎng)時(shí)間停留在細(xì)胞中。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好

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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒穩(wěn)定:適用于對(duì)細(xì)胞增殖狀況的連續(xù)觀察●經(jīng)濟(jì):無(wú)需裂解細(xì)胞,細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)或用于其他實(shí)驗(yàn)●可靠:文獻(xiàn)引用率高,Pubmed有上千篇文獻(xiàn)的引用AlamarBlue®的應(yīng)用●監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖狀態(tài)、研究細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡●監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)因子活性,評(píng)估生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響●物尤其是藥物的開(kāi)發(fā)●環(huán)境污染物質(zhì)的評(píng)估,細(xì)胞毒分析●效價(jià)評(píng)估細(xì)胞增殖過(guò)程中,細(xì)胞體內(nèi)的環(huán)境由氧化環(huán)境變化成還原環(huán)境,呼吸鏈中的NADPH/NADP,FADH/FAD,FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin(刃天青)是一種無(wú)毒、可透膜的藍(lán)色染料,有微弱的熒光性品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好?

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    具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請(qǐng)您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準(zhǔn)備)??贵w的使用量通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn),原則上不回收使用一抗。3、陽(yáng)性對(duì)照樣品(盡量提供)。4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。注:若要檢測(cè)磷酸化蛋白,請(qǐng)?jiān)?-3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行,因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測(cè)不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實(shí)驗(yàn)顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預(yù)實(shí)驗(yàn)采取3個(gè)一抗稀釋度,選取部分實(shí)驗(yàn)樣本。2、正式實(shí)驗(yàn)顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告。六、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明1、提供的蛋白量與待檢測(cè)的目的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加。2、每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè),不足8個(gè)以8個(gè)收取。9-16個(gè)樣品為2張膜,17-24個(gè)樣品為3張膜;以此類推。舉例:7個(gè)樣品,1個(gè)目的蛋白,算1張膜;有9個(gè)樣品,1個(gè)目的蛋白,算2張膜;7個(gè)樣品,2個(gè)目的蛋白,算2張膜,有9個(gè)樣品,2個(gè)目的蛋白,算4張膜。注:以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來(lái)進(jìn)行上樣時(shí),需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)。3、選擇部分樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),參考目的蛋白一抗說(shuō)明書進(jìn)行3個(gè)稀釋度的預(yù)實(shí)驗(yàn)。

該方法無(wú)需DNA變性,無(wú)需抗原修復(fù),無(wú)需抗原抗體反應(yīng),簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè),尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無(wú)需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒在社會(huì)上的重要性。

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    避免反復(fù)凍融。如短時(shí)間內(nèi)需多次重復(fù)使用,請(qǐng)于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實(shí)驗(yàn)步驟(以96孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)細(xì)胞培養(yǎng)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,以每孔4×103~1×105細(xì)胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標(biāo)記1、將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基;2、提前將2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)。江西正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

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細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好